Энэхүү шинэ бүтээл нь хүнсний үйлдвэрлэлтэй холбоотой бөгөөд нийт антиоксидант үйл ажиллагааг тодорхойлоход ашиглаж болно. Энэ аргыг дараах байдлаар гүйцэтгэнэ: аналитик нь урвалж 0.006 M Fe(III) - 0.01 М о-фенантролинтай харилцан үйлчилнэ. Аскорбины хүчил (АА) нь 1:100 харьцаатай ижил урвалжтай урвалд ордог. Дараа нь дор хаяж 90 минутын турш өсгөвөрлөж, 510 ± 20 нм-т фотометрээр хийнэ. Үүний дараа аналитик дохионы хэмжээ нь тухайн бодисын хэмжээнээс хамаарах хамаарлыг тогтоож, нийт AOA-ийн утгыг тооцоолно. Энэхүү танилцуулсан арга нь ургамлын гаралтай материал, хүнсний бүтээгдэхүүний нийт антиоксидант үйл ажиллагааг бага хөдөлмөр зарцуулж, илүү найдвартай тодорхойлох боломжийг олгодог. 2 цалин f-ly, 1 өвчтэй, 5 ширээ.

Энэхүү шинэ бүтээл нь аналитик химитэй холбоотой бөгөөд түүн дээр үндэслэсэн ургамлын болон хүнсний бүтээгдэхүүний нийт антиоксидант идэвхийг (AOA) тодорхойлоход ашиглаж болно.

Бүтээгдэхүүний усан хандыг цахилгаанаар үүсгэгдсэн бромын нэгдлүүдтэй харилцан үйлчлэхэд үндэслэсэн цайны нийт AOA-ийг тодорхойлох мэдэгдэж буй кулонометрийн арга байдаг (И.Ф.Абдулин, Е.Н. Турова, Г.К. Будников. Цайны хандны антиоксидант чадварыг цахилгаанаар хийсэн кулометрийн үнэлгээ. үүсгэсэн бром // Аналитикийн сэтгүүл. хими. 2001. T.56. No 6. P.627-629). Цахилгаан үүсгэсэн бромын нэгдлүүдийг титрлэгч болгон сонгох нь тэдгээрийн янз бүрийн урвалд орох чадвараас шалтгаална: радикал, редокс, электрофиль орлуулалт, олон холбоонд нэмэлт. Энэ нь антиоксидант шинж чанартай цайны биологийн идэвхт нэгдлүүдийн өргөн хүрээг хамрах боломжийг бидэнд олгодог. Энэ аргын сул тал нь антиоксидант биш бодисуудтай броминжуулах урвалд орох боломжтой бөгөөд үүнээс үүссэн нийт AOA-ийн утгыг цахилгаан эрчим хүчний нэгжээр (kC/100 г) илэрхийлдэг бөгөөд энэ нь олж авсан үр дүнг үнэлэхэд хүндрэл учруулдаг.

Мөнгөн усны хальсан электрод дээрх 0.0-оос -0.6 В (харьц. h.s.e.) хооронд хүчилтөрөгчийн цахилгаан бууралтын гүйдлийн харьцангуй өөрчлөлтөөр нийт антиоксидант идэвхийг тодорхойлох вольтметрийн арга байдаг (Пат. 2224997). ОХУ, IPC 7 G 01 N 33/01. Антиоксидантуудын нийт идэвхийг тодорхойлох вольтамметрийн арга / Короткова Е.И., Карбаинов Ю.А. - No 2002115232/12; өргөдөл 06.06.2002; хэвлэл. 02.27.2004). Энэ аргын сул тал нь хажуугийн цахилгаан химийн урвал явагддаг бөгөөд үүний үр дүнд антиоксидантыг тодорхойлох үр ашиг буурч, үр дүнгийн найдвартай байдал буурахад хүргэдэг.

Урьдчилан сэргийлэх болон эмчилгээний антиоксидант бодисын нийт AOA-ийг спектрофотометрийн эсвэл химилюминесцент илрүүлэх аргаар малональдегид хүртэл липидийн хэт исэлдүүлэх замаар хянах мэдэгдэж буй арга байдаг (Пат. 2182706, Орос, IPC 7 G 01 N 33/15, 33/52. урьдчилан сэргийлэх болон эмчилгээний антиоксидант сангуудын антиоксидант үйл ажиллагаа / Павлюченко И.И., Басов А.А., Федосов С.Р. - No 2001101389/14; өргөдөл 01/15/2001; хэвлэгдсэн 05/20/2002). Үүнээс гадна антиоксидант үйл ажиллагаа нь липидийн хэт исэлдэлтийн бүтээгдэхүүний түвшинтэй урвуу хамааралтай байдаг. Энэ аргын сул тал нь зөвхөн нэг бүлэг антиоксидант болох липидүүд тодорхойлогддог тул дүн шинжилгээ хийсэн объектуудын хязгаарлагдмал хүрээ гэж үзэж болно.

Ургамлын хандны нийт AOA-ийг тодорхойлох алдартай арга байдаг бөгөөд энэ нь хандыг линтол ба төмрийн (II) сульфатаар өсгөвөрлөх, хэт ягаан туяагаар исэлдүүлэх урвалыг эхлүүлэх, дараа нь Тритон X-ийн оролцоотойгоор тиобарбитурын хүчилтэй харилцан үйлчлэхээс бүрддэг. 100 (Програм 97111917/13, ОХУ, IPC 6 G 01 N 33/00. Нийт антиоксидант идэвхийг тодорхойлох арга / Рогожин В.В. - Програм 07/08/1997; хэвлэл. 06/10/1999). Спектрофотометрийг хийхдээ 7:3 харьцаатай этилийн спирт ба хлороформын хольцыг хэрэглэнэ. Биологийн материалын AOA үнэ цэнийг ханд агуулсан дээжин дэх урвалын бүтээгдэхүүн - малондиальдегидийн хуримтлалыг прооксиданттай дээжтэй харьцуулсан харьцаагаар тодорхойлно. Энэ аргын сул тал нь хэт ягаан туяаны цацрагийн үед гаж нөлөө үүсэх магадлал бөгөөд энэ нь олж авсан шинжилгээний үр дүнгийн найдвартай байдлыг бууруулдаг.

Нийт AOA-ийг тодорхойлох жагсаасан аргууд нь хэд хэдэн сул талуудтай: хөдөлмөрийн өндөр эрчимжилт, найдвартай байдал бага, нийт AOA-ийн хэмжсэн үнэ цэнэ нь нийтээр хүлээн зөвшөөрөгдсөн аливаа бодистой холбоогүй бөгөөд харьцуулах боломжгүй юм.

Нэхэмжлэгдсэн шинэ бүтээлийн хамгийн ойрын аналог нь исэлдүүлэгч бодис устөрөгчийн хэт исэл (М.Х.Навас, А.М.Химинец, А.Г.Азуэро) байлцуулан люминолтой урвалд ороход үүсэх химилюминесценцийг хэмжих замаар эмийн ургамлын нийт AOA-ийг тодорхойлох арга юм. Канарын үрийн хандмалын бууралтын чадварыг химилюминесценцийн аргаар тодорхойлох нь // Аналитик химийн сэтгүүл. 2004. Т.59. №1. P.84-86). Нийт AOA-ийн хэмжээг тодорхойлохын тулд эмийн түүхий эдийн хандыг бууруулах чадвар, 25-110 мкг хэмжээтэй хүчтэй антиоксидант - аскорбины хүчлийн үйл ажиллагааг харьцуулсан. Жагсаалтад дурдсан аргуудтай харьцуулахад прототип нь устөрөгчийн хэт ислийг исэлдүүлэгч бодис болгон ашигладаг бөгөөд энэ нь өргөн хүрээний антиоксидантуудтай харилцан үйлчилдэг бөгөөд объектын нийт AOA-ийн хэмжсэн утгыг аскорбины хүчилтэй харьцуулан тодорхойлж, илэрхийлдэг. хүлээн зөвшөөрөгдсөн антиоксидант нь бусад сул талуудыг хадгалахын зэрэгцээ найдвартай үр дүнд хүрэх боломжийг олгодог. Сул талууд нь аргад ашигласан тоног төхөөрөмжийн нарийн төвөгтэй байдлыг агуулдаг.

Нэхэмжлэгдсэн шинэ бүтээлийн техникийн зорилго нь түүн дээр үндэслэсэн ургамлын болон хүнсний бүтээгдэхүүний нийт антиоксидант идэвхийг тодорхойлох хөдөлмөр бага зарцуулдаг, найдвартай аргыг боловсруулах явдал юм.

Техникийн асуудлыг шийдэхийн тулд шинжлэгдэх бодисыг 0.006 M Fe(III) - 0.01 М о-фенантролин, аскорбины хүчил (АА) -ийг 1:100 харьцаатай ижил урвалжтай харилцан үйлчлэлцүүлэхийг санал болгож байна. , дор хаяж 90 минутын турш өсгөвөрлөж, 510±20 нм-т фотометрээр хэмжиж, дараа нь аналитик дохионы утгын бодисын хэмжээнээс хамаарлыг тогтоож, нийт AOA-ийн утгыг тооцоолно. Ялангуяа тооцооллыг судалж буй объект ба аскорбины хүчил хоорондын тоон харгалзах тэгшитгэлээс гаргаж авсан (I) томъёог ашиглан хийж болно.

Энд a, b нь АС-ийн хэмжээнээс аналитик дохионы хамаарлын регрессийн тэгшитгэл дэх коэффициентүүд;

a", b" - судалж буй объектын хэмжээнээс аналитик дохионы хамаарлын регрессийн тэгшитгэл дэх коэффициентүүд;

x нар - судалж буй бууруулагч бодисын (дээж) масс, мг.

Санал болгож буй урвалжийг заасан нөхцөлд ашиглах нь шугаман хүрээг өргөжүүлж, аскорбины хүчлийн тодорхой хэмжээний доод хязгаарыг бууруулах боломжтой болсон. Санал болгож буй чухал шинж чанаруудын багц нь тэдгээрийн үндсэн дээр олон төрлийн ургамлын гаралтай материал, хүнсний бүтээгдэхүүний нийт AOA-ийг тодорхойлох боломжийг олгодог.

Тоон захидал харилцааны тэгшитгэл нь ижил антиоксидант үйл ажиллагааны нөхцөлд аналитик дохионы аскорбины хүчлийн хэмжээ болон шинжилгээний объектын хэмжээнээс хамаарах аналитик дохионы хамаарлыг холбодог.

Аналитик дохионы магнитудын фотометрийн хэмжилтийн үр дүнг хамгийн бага квадратын аргаар боловсруулсны дараа (К. Дерффел Статистикийн аналитик хими. - М.: "Мир", 1994. П.164-169; А.К. Чарыков Математик боловсруулалт химийн шинжилгээний үр дүн - Л.: Хими, 1984. 137-144 тал) эдгээр хамаарлыг шугаман регрессийн функцээр тодорхойлсон: y=ax+b, энд a нь регрессийн коэффициент, b нь чөлөөт гишүүн юм. Регрессийн тэгшитгэл дэх a коэффициент нь шулуун шугамын х тэнхлэгт налуу өнцгийн тангенстай тэнцүү; коэффициент b - y тэнхлэгийн дагуух эх үүсвэрээс (0,0) эхний цэг хүртэлх зай (x 1, y 1).

a ба b коэффициентийг дараах томъёогоор тооцоолно.

Тухайн үеийн аскорбины хүчлийн хэмжээнээс АС-ийн хамаарлын регрессийн тэгшитгэл нь дараах хэлбэртэй байна.

y AK = a x AK (мг) + b,

АС-ийн судлагдсан объектын хэмжээнээс (бууруулах бодис) хамаарах регрессийн тэгшитгэл:

y VOST =a" x VOST (мг)+б",

хаана AK, VOST үед фотометрийн уусмалын оптик нягтрал;

x AA (мг), x VOST (мг) - уусмал дахь аскорбины хүчил (бууруулах бодис) концентраци;

Дараа нь функцүүдийн утгыг тэнцүүлж, бид судлагдсан объектын антиоксидант үйл ажиллагааг аскорбины хүчлийн (мг) нэгжээр тооцоолох томъёог (I) авна.

Зураг дээр аналитик дохио нь бууруулагчийн хэмжээнээс хамааралтай болохыг харуулж байна.

Шинжилсэн уусмалын оптик нягтыг KFK-2MP фотоэлектроколориметр ашиглан хэмжсэн.

Мэдэгдэж байгаагаар (Ф. Умланд, А. Ясин, Д. Тирик, Г. Вюнш Аналитик химийн нэгдлүүд - М.: Мир, 1975. - 531 х.) о-фенантролин нь төмрөөр усанд уусдаг хелат үүсгэдэг. II) улаан улбар шар өнгө нь λ=512 нм-ийн хамгийн их шингээлтээр тодорхойлогддог. Иймд санал болгож буй аргад фотометрийг λ=510±20 нм-д хийдэг.

Урвалжийн найрлага, урвалд оруулсан тоо хэмжээг оновчтой болгох нь туршилт бүрт судлагдсан бүх хүчин зүйл, түвшин тус бүрийг өөрчлөхөөс бүрдсэн "Латин квадрат" аргыг ашиглан олон хүчин зүйлийн туршилт төлөвлөлтийн үр дүнд үндэслэн хийсэн. хүчин зүйл бүрийн өөр өөр түвшний хүчин зүйлүүдтэй нэг л удаа тохиолддог. Энэ нь судалж буй хүчин зүйл бүрийн нөлөөг тусад нь ялгаж, үнэлэх боломжийг олгодог.

Хүчин зүйлс нь: Fe(III), о-фенантролины хэмжээ, урвалд оруулсан урвалжийн хэмжээ байв. Хүчин зүйлсийн хослол нь нэг талаас аналитик дохионы шугаман чанарыг (AS) хангалттай мэдрэмжтэй, нөгөө талаас урвалжийн тогтвортой байдлыг хангах ёстой. Энэ нь хүчин зүйл бүрийн хувьд дараах түвшинг тодорхойлох боломжтой болсон.

Fe(III)-ийн хэмжээ: 0.003 М (A 1); 0.006 М (A 2); 0.009 М (A 3);

о-фенантролины хэмжээ: 0.01 М (B 1); 0.02 М (B 2); 0.03 М (B 3);

урвалжийн хэмжээ: 0.5 мл (C 1); 1.0 мл (C 2); 2.0 мл (C 3) (Хүснэгт 1).

Хүчин зүйлийн түвшингийн оновчтой хослолыг сонгохын тулд бид AC-ийн аскорбины хүчлийн хэмжээнээс 10-аас 150 мкг хүртэлх калибровкийн хамаарлыг олж авсан (энэ нь функцын шугаман байдлыг баталгаажуулахад шаардлагатай), олж авсан хамаарлын регрессийн тэгшитгэлийг тооцоолсон. , дараа нь аскорбины хүчлийн өгөгдсөн хэмжээний (120 мкг) АС-ийн утгыг тооцоолсон. Тиймээс урвалжийн найрлага (А, В хүчин зүйлүүд) тус бүрийн хувьд хувьсах гүйдлийн утга хамгийн их байх эзлэхүүнийг (С хүчин зүйл) сонгосон. Энэ нь бидэнд авч үзсэн хослолын тоог есөн болгон бууруулах боломжийг олгосон (Хүснэгт 2).

Түвшин тус бүрийн нийт хувьсах гүйдлийг харьцуулж үзэхэд хамгийн их утгатай дүнг тодорхойлсон: ΣA 2 (0.991); ΣB 1 (1.066); ΣC 2 (1.361). Энэ нь урвалжийн оновчтой найрлага нь: 0.006 M Fe(III) - 0.01 М о-фенантролин, 100 мл уусмал тутамд 1.0 мл-ийн урвалд оруулсан хэмжээ гэж дүгнэх боломжийг бидэнд олгосон.

Урвалжийн хамгийн оновчтой концентрацитай үед бид урвалын хольцын инкубацийн янз бүрийн хугацаанд (30, 60) байгалийн объектод түгээмэл тохиолддог аскорбины хүчил ба зарим бууруулагч бодис (таннин, рутин, кверцетин) -ийн концентрациас АС-ийн хамаарлын өөрчлөлтийг судалсан. , 90, 120 мин). Судалгаанд хамрагдсан бүх бууруулагч бодисын хувьд хувьсах гүйдлийн хамаарал нь тэдгээрийн агууламжаас 10-150 мкг (зураг харна уу) шугаман байна, хувьсах гүйдлийн утга нь инкубацийн хугацаанаас хамаарна (Хүснэгт 3).

Рутины нөлөөн дор АС-ийн өөрчлөлт нь ач холбогдолгүй, таннин ойртож, кверцетин нь аскорбины хүчлийн хамаарлаас давж байгааг зургаас харж болно. Бүх судлагдсан бууруулагч бодисуудын инкубацийн хугацаанаас хамаарч AS-ийн өөрчлөлтийг авч үзэхэд (Хүснэгт 3) 90 минутаас хойш аналитик дохио тогтворжих нь ажиглагдсан.

Хүснэгт 3 Цаг хугацааны явцад бууруулагч бодисын хувьсах гүйдлийн өөрчлөлт
Туршилтын бодис	м бодис, мг/см 3	Аналитик дохио
Туршилтын бодис	м бодис, мг/см 3	Урвалын хольцын инкубацийн хугацаа, мин
30	60	90	120
Аскорбины хүчил	10	0,038	0,042	0,044	0,044
100	0,340	0,352	0,360	0,363
Таннин	10	0,029	0,037	0,042	0,043
100	0,280	0,295	0,303	0,308
Рутин	10	0,013	0,016	0,019	0,019
100	0,150	0,166	0,172	0,175
Кверцетин	10	0,031	0,044	0,051	0,053
100	0,420	0,431	0,438	0,442

Тодорхойлсон AOA утгын нийлбэр шинж чанарыг нотлохын тулд Fe (III) урвалж - о-фенантролиныг бууруулагч бодисууд: таннин, рутин, кверцетин, аскорбины хүчил зэрэг янз бүрийн хувь хэмжээгээр багтаасан загвар шийдэлд үзүүлэх нөлөөг судалсан. Загварын хольцын шинжилгээний үр дүнг хүснэгт 4-д үзүүлэв.

Хүснэгт 4 Загварын хольцын шинжилгээний үр дүн (P=0.95; n=3)
Холимог дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн тоо	Нийт AOA, тооцоолсон, μgAC	Нийт AOA, олдсон, μgAC
танилцуулсан	Нийт AOA, тооцоолсон, μgAC	Нийт AOA, олдсон, μgAC	АК-ийн хувьд
АК	Таннин	Рутин	Кверцетин	АК	Таннин	Рутин	Кверцетин
-	20	20	20	-	16,77	9,56	32,73	59,06	57,08
-	10	10	10	-	8,35	4,77	16,41	29,53	26,95
-	50	10	10	-	42,02	4,77	16,41	63,20	55,04
-	10	50	10	-	8,35	23,93	16,41	48,69	50,06
-	10	10	50	-	8,35	4,77	81,70	94,82	91,61
-	30	10	10	-	25,19	4,77	16,41	46,37	39,24
-	10	30	30	-	8,35	14,35	49,06	71,76	73,47
20	20	20	20	20	16,77	9,56	32,73	79,06	96,29
50	10	10	10	50	8,35	4,77	16,41	87,95	93,07
10	50	10	10	10	42,02	4,77	16,41	73,20	78,15
10	10	50	10	10	8,35	23,93	16,41	58,69	78,74
10	10	10	50	10	8,35	4,77	81,70	104,82	121,45
30	30	10	10	30	25,19	4,77	16,41	76,37	84,59
10	10	30	30	10	8,35	14,35	49,06	81,76	103,31

Нийт AOA-ийн онолын утгыг тооцоолохдоо ижил антиоксидант үйл ажиллагааны нөхцөлд аскорбины хүчилтэй харьцуулахад судлагдсан бууруулагчийн антиоксидант чадварыг тодорхойлсон тоон харгалзах тэгшитгэлийг ашиглан гүйцэтгэсэн: .

Туршилтын (олдсон) AOA-ийн утгыг АС-ийн аскорбины хүчлийн хэмжээнээс хамаарах дундаж регрессийн тэгшитгэлийг ашиглан тооцоолсон. Хүснэгт 4-т үзүүлсэн үр дүнгээс харахад туршилтаар олж авсан AOA-ийн утгууд нь онолын хувьд тооцоолсон утгатай тохирч байгаа нь тодорхой байна.

Тиймээс тодорхойлсон AOA утга нь хураангуй үзүүлэлт бөгөөд тоон харгалзах тэгшитгэлийг ашиглан түүний утгыг тодорхойлох нь зөв юм.

Санал болгож буй аргыг бодит дээж дээр туршсан. Бодит дээж эсвэл түүний хандны нийт AOA-ийг тодорхойлохын тулд урвалын хольцын инкубацийн хугацаа дор хаяж 90 минут байх үед АС-ийн шинжлэгдэх бодис ба аскорбины хүчлийн хэмжээнээс тохируулгын хамаарлыг олж авсан. Нийт AOA-ийн тооцоог (I) томъёоны дагуу хийж, туршилтын объектын грамм тутамд мг аскорбины хүчил (мгАА/г)-ээр илэрхийлэв.

Санал болгож буй аргын үнэн зөвийг батлахын тулд эдгээр дээжийг аскорбины хүчил (ГОСТ 24556-89 Жимс, хүнсний ногооны боловсруулсан бүтээгдэхүүн. С витаминыг тодорхойлох арга) болон зонхилох бууруулагч бодисууд: цайнд агуулагдах танниныг үнэлж, мэдэгдэж буй аргуудыг ашиглан туршиж үзсэн. (ГОСТ 19885-74 Цай. Агуулга таннин, кофеиныг тодорхойлох арга), сарнай хонго - органик хүчлийн хэмжээ (ГОСТ 1994-93 сарнайн хонго. Техникийн нөхцөл) (Хүснэгт 5).

Антиоксидантууд (AO)- исэлдэлтээс сэргийлдэг бодисууд. Амьд организмын исэлдэлтийн тэргүүлэх хүчин зүйл нь чөлөөт радикалууд үүсэх тул биологийн систем дэх антиоксидантуудын үйл ажиллагааг үндсэндээ органик бодисыг чөлөөт радикалуудаар исэлдүүлэхээс урьдчилан сэргийлэх үүднээс авч үздэг.

Одоогийн байдлаар антиоксидантыг тодорхойлох олон тооны янз бүрийн аргууд байдаг: фотометрийн, хими, цахилгаан химийн гэх мэт. Гэсэн хэдий ч тэдгээрийн олонх нь эдгээр аргуудаар олж авсан үр дүнг ойлгох, цаашид ашиглахад хэцүү болгодог мэдэгдэхүйц сул талуудтай байдаг. Хамгийн нийтлэг сул талууд нь дараахь зүйлийг агуулдаг.

Антиоксидант нөлөөг хэмжихийн тулд биологийн системийн зохиомол буюу өвөрмөц бус нөхцлийг ашигладаг. Жишээлбэл, биологийн чөлөөт радикал урвалын оронд цэвэр химийн исэлдэлтийн урвалыг ашигладаг, эсвэл цахилгаан гүйдэлд өртөх үед бодисын электрон өгөх/хүлээн авах чадварыг хэмждэг. Ийм нөхцөлд олж авсан хэмжилтийн үр дүн нь судалж буй бодис нь биед ижил "антиоксидант" нөлөө үзүүлэх эсэхийг хэлэх боломжийг бидэнд олгодоггүй.
Антиоксидант нөлөөг тодорхойлох нь хуримтлагдсан исэлдэлтийн бүтээгдэхүүн (исэлдэлтийн маркер) хэмжээг хэмжих замаар хийгддэг. Ийм байдлаар туршилтын дээжинд агуулагдах антиоксидантын хэмжээг тодорхойлох боломжтой боловч антиоксидантийн үйл ажиллагааны талаарх маш чухал мэдээлэл алга болдог. Антиоксидантуудын үйл ажиллагааг үл тоомсорлох нь эргээд түүний хэмжээг тодорхойлоход ихээхэн алдаа гаргахад хүргэдэг, жишээлбэл, удаан боловч удаан хугацаанд үйлчилдэг "сул" антиоксидантуудын хувьд.

Ерөнхийдөө антиоксидантыг тодорхойлох чиглэлээр янз бүрийн аргаар олж авсан үр дүнг харьцуулах боломжийг олгодог стандартчилал байдаггүй.

Химилюминесцент арга Энэ нь антиоксидантыг судлах хамгийн мэдээлэл сайтай арга бөгөөд хэд хэдэн чухал давуу талтай:

Антиоксидант нөлөөг шууд тодорхойлох- чөлөөт радикалуудад антиоксидантуудын шууд нөлөөг тэмдэглэсэн. Химилюминесцент арга нь чөлөөт радикалуудыг үүсгэх химийн системийг ашигладаг бөгөөд энэ нь хяналтын химилюминесцент туяа өгдөг. Дараа нь антиоксидантыг ийм системд нэмдэг бөгөөд энэ нь чөлөөт радикалуудыг саармагжуулдаг бөгөөд энэ нь хяналтын химилюминесценцийг дарахад хүргэдэг.
Энэхүү аргын чухал давуу тал нь чөлөөт радикалуудыг бий болгоход янз бүрийн химийн системийг ашиглах боломж бөгөөд энэ нь антиоксидантуудын өвөрмөц байдал, тэдгээрийн үйл ажиллагааны нутагшуулалтыг цаашид тодорхойлох боломжийг олгодог.
Антиоксидантуудын тоон болон чанарын шинж чанарыг хэмжих- химилюминесцент арга нь антиоксидант нөлөө бүхий аливаа нэгдлийг бие даасан хоёр үзүүлэлтээр тодорхойлох боломжийг танд олгоно.
- Антиоксидант хүчин чадал (AOE)- тодорхой хэмжээний дээжинд агуулагдах нэгдлийг саармагжуулах чөлөөт радикалуудын нийт хэмжээ.
- Антиоксидант үйл ажиллагаа (AOA)- чөлөөт радикалуудыг саармагжуулах хурд, i.e. нэгж хугацаанд саармагжуулсан радикалуудын тоо.

Химилюминесцент арга антиоксидантуудын нөлөөг тоон (AOE) ба чанарын (AOA) гэсэн хоёр үзүүлэлтээр үнэлэх ёстой гэсэн чухал ойлголтыг өгдөг.
Энэ нөхцөл байдлыг дараах зураг харуулж байна.

Төрөл бүрийн антиоксидантуудын химилюминесценцэд үзүүлэх нөлөө
(графикийн хажууд байгаа тоонууд нь антиоксидант концентрацийг харуулж байна):
зүүн талд нь "хүчтэй" антиоксидант, баруун талд "сул" антиоксидант байна.

Антиоксидантууд нь үйл ажиллагаагаараа ихээхэн ялгаатай байдаг. "Хүчтэй" антиоксидантууд байдаг, өөрөөр хэлбэл. Чөлөөт радикалуудыг өндөр хурдаар дарангуйлж, химилюминесценцийг бүрэн дардаг өндөр идэвхтэй антиоксидант. Ийм антиоксидантууд нь бага концентрацид ч хамгийн их нөлөө үзүүлдэг бөгөөд хурдан хэрэглэдэг. Нөгөөтэйгүүр, "сул" антиоксидантууд байдаг, i.e. Чөлөөт радикалуудыг бага хэмжээгээр дарангуйлж, химилюминесценцийг хэсэгчлэн дарангуйлдаг бага хүчтэй антиоксидантууд. Ийм антиоксидантууд нь зөвхөн өндөр концентрацид ихээхэн нөлөө үзүүлдэг боловч үүнтэй зэрэгцэн аажмаар хэрэглэж, удаан хугацаанд үйлчилдэг.

Антиоксидант үзүүлэлтүүдийг тодорхойлоход химилюминесцент аргыг ашиглаж болно.

биологийн шингэн (плазм, шүлс, шээс);
фармакологийн эм, хүнсний нэмэлт тэжээл;
ундаа, хүнсний нэмэлт;
гоо сайхны бүтээгдэхүүн, арчилгааны бүтээгдэхүүн;
гэх мэт.

Антиоксидантыг тодорхойлох химилюминесцент аргыг хэрэгжүүлэхийн тулд дараахь төхөөрөмжийг ашиглахыг зөвлөж байна.

Chemiluminometer Lum-100 - 1 дээжийн химилюминесценцийн термостат, бүртгэлийг хангадаг.
Chemiluminometer Lum-1200 - температурын хяналт, 12 хүртэлх дээжийн химилюминесценцийг нэгэн зэрэг бүртгэх боломжийг олгодог.

1 Болшакова Л.С. 1Милентьев В.Н. 2Санников Д.П. 3Казмин В.М. 2

1 Холбооны улсын төсвийн боловсролын дээд мэргэжлийн боловсролын байгууллага "Орёл улсын эдийн засаг, худалдааны дээд сургууль"

2 Холбооны улсын төсвийн байгууллага "Орловскийн Химижилт, хөдөө аж ахуйн радиологийн төв"

3 Холбооны улсын төсвийн боловсролын дээд мэргэжлийн боловсролын байгууллага "Улсын их сургууль - Боловсрол, судалгаа, үйлдвэрлэлийн цогцолбор"

Шим тэжээлийн антиоксидант үйл ажиллагааг үнэлэхийн тулд химилюминесценцийг ашиглах боломжийг судалсан. Санал болгож буй арга нь шүлтлэг орчинд люминолын химилюминесценц дээр суурилдаг бөгөөд түүний эрчим нь химилюминесцент дээж дэх хэт ислийн хэмжээнээс хамаарна. Химилюминесценцийг тунгийн насос, гэрэл нэвтрүүлдэггүй камер, шилэн вакуум фото үржүүлэгч, компьютерийн системийг агуулсан суурилуулсан суурилуулалтыг ашиглан бүртгэсэн. Химилюминесценцийг сайжруулахын тулд люминолд калийн төмрийн сульфидын уусмал нэмсэн. Шинжилсэн дээжийг люминолын уусмалд оруулах үед химилюминесценцийн эрчмийн өөрчлөлтийг тэмдэглэв. Шинжилгээний дээж болгон хуурай нам температурт нэрэх аргаар гаргаж авсан Dandelion хандыг ашигласан. Энэ нь өндөр антиоксидант үйл ажиллагаагаараа алдартай фенолын нэгдлүүдийг агуулдаг. Хемилюминесценцийн аргыг янз бүрийн хүнсний нэгдлүүдийн антиоксидант шинж чанарыг тодорхойлоход ашиглаж болохыг тогтоосон.

Ном зүйн холбоос

Паничкин А.В., Болшакова Л.С., Милентьев В.Н., Санников Д.П., Казмин В.М. ХЭМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЙГ ХҮНСНИЙ БОДИСНЫ АНТИоксидант шинж чанарыг үнэлэхэд ашиглах // Зөв зохистой хооллолт, хүнсний нэмэлт, биостимулятор. – 2014. – No 6. – P. 36-37;
URL: http://journal-nutrition.ru/ru/article/view?id=283 (хандалтын огноо: 12/17/2019). "Байгалийн Шинжлэх Ухааны Академи" хэвлэлийн газраас эрхлэн гаргадаг сэтгүүлүүдийг та бүхэнд хүргэж байна.

төгсөлтийн ажил

1.4 Антиоксидант судлалын аргууд

Антиоксидант үйл ажиллагааг дараахь байдлаар ангилдаг: илэрсэн AOA-ийг бүртгэх аргын дагуу (эзэлхүүний, фотометрийн, химилюминесцент, флюресцент, цахилгаан химийн); исэлдэлтийн эх үүсвэрийн төрлөөр; исэлдэж буй нэгдлийн төрлөөр; исэлдсэн нэгдлийг хэмжих аргаар .

Гэсэн хэдий ч антиоксидант үйл ажиллагааг тодорхойлох хамгийн алдартай аргууд нь:

1 TEAC (trolox эквивалент антиоксидант хүчин чадал): арга нь дараах урвал дээр суурилдаг.

Метмиоглобин + H 2 O 2 > Феррилглобин + ABTS > ABTS * + AO.

Trolox эквивалент арга (TEAC) нь антиоксидантуудын 2,2-азинобисын радикал катионыг (ABTS) бууруулж, улмаар спектрийн урт долгионы бүсэд (600 нм) шингээлтийг саатуулдаг чадварт суурилдаг. Аргын мэдэгдэхүйц сул тал бол радикал үүсгэх хоёр үе шаттай урвал юм. Энэ нь шинжилгээний хугацааг уртасгаж, стандартчилагдсан урвалжуудыг шинжилгээнд ашигладаг хэдий ч үр дүнгийн тархалтыг нэмэгдүүлэх боломжтой.

2 FRAP (төмрийн антиоксидантыг багасгах): арга нь дараах урвал дээр суурилдаг.

Fe(III)-Трипиридитриазин+АО>Fe(II)-Трипиридитриазин.

Төмөр бууруулах/антиоксидант хүчин чадал (FRAP). Энд ашигласан урвал бол Fe(III)-трипиридилтриазиныг Fe(II)-трипиридилтриазин болгон бууруулах явдал юм. Гэсэн хэдий ч энэ арга нь глутатион гэх мэт зарим антиоксидантуудыг тодорхойлох боломжгүй юм. Энэ арга нь бага молекул жинтэй антиоксидантыг шууд тодорхойлох боломжийг олгодог. Бага рН-ийн үед Fe (III) - трипиридилтриазины цогцолборыг Fe (II) цогцолбор болгон бууруулснаар эрчимтэй цэнхэр өнгө дагалддаг. Хэмжилт нь антиоксидантуудын урвалын холимогт үүссэн урвалын зүйлийн исэлдэлтийн нөлөөг дарах чадвар дээр суурилдаг. Энэ аргыг хэрэгжүүлэхэд хялбар, хурдан бөгөөд зардал багатай.

3 ORAC (хүчилтөрөгчийн радикал шингээх чадвар): арга нь дараах урвал дээр суурилдаг.

Fe(II)+H 2 O 2 >Fe(III) + OH*+AO>OH* + Люминол.

Хүчилтөрөгчийн радикал шингээх чадварыг тодорхойлох (ORAC). Энэ аргын хувьд ROS-тай харилцан үйлчлэлийн үр дүнд үүссэн субстратын (фикоэритрин эсвэл флуоресцеин) флюресценцийг бүртгэдэг. Хэрэв туршилтын дээж нь антиоксидант агуулсан бол хяналтын дээжтэй харьцуулахад флюресценцийн бууралт ажиглагдаж байна. Энэ аргыг анх 1992 онд Хөгшрөлтийн үндэсний хүрээлэнгийн доктор Гуохуа Као боловсруулсан. 1996 онд Доктор Као АНУ-ын Хөгшрөлтийн судалгааны төвд Доктор Рональд Прайертай хамтран хагас автоматжуулсан аргыг боловсруулсан. үүсгэсэн.

4 TRAP (радикал барих антиоксидант нийт параметр): арга нь дараах урвал дээр суурилдаг.

AAPH+AO>AAPH* + PL (FE).

Энэ арга нь антиоксидантуудын пероксил радикал 2,2-азобис (2-амидинопропан) дигидрохлорид (AAPH)-тай харилцан үйлчлэх чадварыг ашигладаг. TRAP-ийн өөрчлөлтүүд нь аналитик дохиог бүртгэх аргуудаас бүрддэг. Ихэнх тохиолдолд шинжилгээний эцсийн шатанд перокси радикал AAPH нь люминесцент (люминол), флюресцент (дихлорофлуоресцеин диацетат, DCFH-DA) эсвэл бусад оптик идэвхтэй субстраттай харилцан үйлчилдэг.

Усанд уусдаг Е витамины дериватив Trolox (6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбоксик хүчил) нь TEAC, ORAC, TRAP аргуудын стандарт болгон ашигладаг.

Сүүлийн үед антиоксидант үйл ажиллагааг үнэлэхийн тулд цахилгаан химийн аргыг ашиглах сонирхол нэмэгдэж байна. Эдгээр аргууд нь өндөр мэдрэмжтэй, хурдан дүн шинжилгээ хийдэг.

Зарим хүнсний бүтээгдэхүүний антиоксидант үйл ажиллагааны үнэлгээг энол (-OH) ба сульфгидрил (-SH) бүлгүүдийн улмаас исэлдүүлэх урвалд оролцох антиоксидант бодисын шинж чанарыг ашиглахад үндэслэн потенциометрийн аргаар хийдэг.

Уусмалын антиоксидант шинж чанарыг тодорхойлох нь антиоксидантуудын зуучлагч системтэй химийн харилцан үйлчлэлд суурилдаг бөгөөд энэ нь түүний исэлдэлтийн потенциалыг өөрчлөхөд хүргэдэг. Редокс потенциалыг хэмжихийн өмнө K-Na-фосфатын буферийн уусмал, Fe(III)/Fe(II) зуучлагч систем, нийлмэл электрод агуулсан савыг цахилгаан химийн эс гэнэ. Антиоксидант үйл ажиллагааг г-экв/л-ээр үнэлдэг.

Антиоксидант идэвхийг тодорхойлох амперометрийн арга нь тодорхой потенциалын дор байгаа ажлын электродын гадаргуу дээрх туршилтын бодисыг исэлдүүлэх явцад үүсэх цахилгаан гүйдлийг хэмжихэд суурилдаг. Амперометрийн аргын мэдрэмжийг ажлын электродын шинж чанар болон түүнд хэрэглэж буй потенциалаар тодорхойлно. Полифенол ба флавоноидуудын амперометрийн детекторын илрүүлэх хязгаар нь нано-пикограммын түвшинд байдаг бөгөөд ийм бага концентрацитай үед янз бүрийн антиоксидантууд хамтдаа байх үед харилцан үйлчлэх магадлал, ялангуяа синергетик үзэгдлийн илрэл бага байдаг. . Аргын сул тал нь түүний өвөрмөц байдлыг агуулдаг: эдгээр нөхцөлд хүчилтөрөгчийн цахилгаан бууралтын потенциалын бүсэд исэлдүүлсэн эсвэл буурдаг антиоксидантуудыг шинжлэх боломжгүй юм. Аргын давуу тал нь түүний хурд, түрүү булчирхай, мэдрэмж зэрэг орно.

Цахилгаанаар үүсгэгдсэн исэлдүүлэгчийг ашиглан гальваностатик кулометрийн арга - энэ аргыг өөхөнд уусдаг антиоксидантыг шинжлэхэд ашигладаг.

Аскорбины хүчлийг тодорхойлох янз бүрийн аргыг боловсруулсан:

уусмалд энгийн дүрэх замаар никель (II) гексацианоферрат хальсаар өөрчилсөн хөнгөн цагаан электродыг ашиглан амперометрийн арга;

Wawele урвалжаар өөрчилсөн цахиурын хүчлийн ксерогел ба зэс (II)-ийг индикатор нунтаг болгон ашиглан аскорбины хүчлийг хатуу фазын спектрофотометрийн болон харааны туршилтаар тодорхойлох арга;

аскорбины хүчлийг химилюминесцентээр тодорхойлохдоо хүхрийн хүчлийн орчинд цери (IV)-тэй родамин В-ийн химилюминесцент урвалыг ашиглан урсгал тарилгын аргаар хийж болно.

усан ба усан-органик орчинд анод вольтметрийн аргаар 10 -8 -10 -3 г/см 3-ийн хүрээнд аскорбины хүчлийг тодорхойлох.

Хамгийн түгээмэл нь FRAP арга бөгөөд хурдан бөгөөд өндөр мэдрэмжтэй байдаг. Сүүлийн хэдэн арван жилийн хугацаанд FRAP аргыг ашиглан антиоксидант идэвхийг тодорхойлох олон тооны аргыг боловсруулсан (Хүснэгт 1).

Хүснэгт 1 Төрөл бүрийн объектын антиоксидант үйл ажиллагааг тодорхойлох FRAP аргыг боловсруулах ба түүний хэрэглээ

	Шинжилгээний объектууд	Тэмдэглэл
	Цусны плазм	t=4мин. Урвалын стехиометр ба нэмэлтийг судалсан.
	Цай, дарс	Полифенолын улмаас үүссэн AOA-ийг тодорхойлох
		Цайны янз бүрийн сортуудын AOA утгыг харьцуулсан
Пулидо, Браво, Саура-Каликсто	Загварын шийдлүүд	t=30мин. Усан бус уусгагчийн нөлөө илэрсэн
	Ургамал
	Цус, эд	PIA арга. Гадны бодисын нөлөөг туршиж үзсэн.
Фирузи, Лаканна, Петруччи e.a.	Загварын шийдлүүд	Төрөл бүрийн AO-ийн тодорхойлох мэдрэмжийг тэдгээрийн бүтэц, исэлдэлтийн потенциалаас хамааруулан судалсан.
Каталинич, Милош,	Төрөл бүрийн дарс
Темердашев, Цюпко болон бусад.	Загварын холимог
Логинова, Коновалова	Эм Эм	Туршилтын арга
Темердашев, Цюпко болон бусад.	Хуурай улаан дарс	Дарсны чанарын бусад үзүүлэлтүүдтэй AOA-ийн хамаарал
1-р хүснэгтийн үргэлжлэл
	Загварын холимог	Янз бүрийн AO-ийг тодорхойлох мэдрэмжийг судалсан
Вершинин, Власова, Цюпко	Загварын холимог	Исэлдүүлэгч бодис дутагдалтай үед дохио нь нэмэлт биш болохыг тогтоосон
Анисимович, Дейнека болон бусад.	Загварын шийдлүүд	AOA-ийг үнэлэх кинетик параметрүүдийг санал болгосон.

Тайлбар: Уламжлалт байдлаар: FIA-урсгалын тарилгын шинжилгээ, TPTZ-трипиридилтриазин, DIP-2,2,-дипиридил, PHEN-o-фенантролин, DPA-пиридиндикарбоксилын хүчил, FZ-феррозин, АА-аскорбины хүчил, CT-катехол, т - өртөх хугацаа, мин.

Усан уусмал дахь уураг ба полиэлектролит хоорондын харилцан үйлчлэл

Уураг-полиэлектролитийн цогцолборыг тодорхойлохын тулд янз бүрийн аналитик аргуудыг ашигладаг. Багажны аргууд нь бүтцийн болон оптик шинж чанарын талаар мэдээлэл өгөхөөс гадна PEC холболтын динамик ба шинж чанарыг тодорхойлдог ...

Хоёр туйлт мембран дахь усны молекулын диссоциацийн хурдад d-металлын нэгдлүүдийн нөлөө

Шинэ BPM-ийг нэгтгэх явцад олж авсан дээжийн шинж чанарыг судлах, нийлэгжүүлсэн мембраны цахилгаан химийн шинж чанарыг сайжруулах синтезийн нөхцлийг сонгоход ихээхэн анхаарал хандуулах хэрэгтэй.

Дизайнерын эм, синтетик каннабиноид

Ургамлын холимог дахь синтетик каннабиноидыг илрүүлэх нь хроматографи-масс спектрометр, хийн хроматограф, нимгэн давхаргын хроматограф, өндөр үзүүлэлттэй шингэн хроматограф зэрэг физик-химийн янз бүрийн аргуудаар...

Эмийн ургамлын гаралтай флавоноидыг тодорхойлох аргыг боловсруулах

Хинолинонины синтез ба фармакологийн шинж чанар-2

Судалгааны объект: Хинолинон-2. Судалгааны арга: Компьютерийн "Marvin JS" програмыг ашиглан бодисын бүтцийг бий болгосон. Дараа нь түүнийг "http://www.way2drug.com/PASSOnline/predict.php" сайт руу явуулж, цаашдын судалгаанд хамруулжээ...

Эпокси полимер ууршилтын бүтээгдэхүүнийг судлах дулааны спектрийн арга

Хавч хэлбэрийн хясаанаас өндөр цэвэршүүлсэн хитозан үйлдвэрлэх технологи

Хитозаны молекулын жинг тодорхойлох Хитозаны молекул жинг стандарт аргаар вискозиметрийн аргаар тодорхойлно. Полимер нунтаг дээжийг ацетат буферт уусгаж 0.05 ба 0.5 г/дл концентрацитай уусмалыг бэлтгэсэн.

Байгалийн цэцэрлэгт хүрээлэнгийн нутаг дэвсгэрийн физиологийн шинж чанар

Түлхүүр үгс

чөлөөт радикал/антиоксидант/ антиоксидант үйл ажиллагаа / нийт антиоксидант хүчин чадал / химилюминесцент/ люминол / чөлөөт радикал / антиоксидант / антиоксидант үйл ажиллагаа / нийт антиоксидант хүчин чадал / хемилюминесценц / люминол

тайлбар химийн шинжлэх ухааны шинжлэх ухааны нийтлэл, шинжлэх ухааны бүтээлийн зохиогч - Георгий Константинович Владимиров, Е.В.Сергунова, Д.Ю.Измайлов, Ю.А.Владимров.

Эмийн ургамлын гаралтай материалууд нь хүний биед агуулагдах антиоксидантуудын нэг юм. Ургамлын объект дахь антиоксидантуудын агууламжийг тодорхойлох аргуудын дунд химилюминесценцийн шинжилгээний арга өргөн тархсан байдаг. Энэ ажилд үүнийг тооцоолоход ашигласан нийт антиоксидант хүчин чадал(OAE) rowan жимс, сарнай хонго, долоогоно, бөөрөлзгөнө жимс нь дусаах decoctions. Туршилтанд кинетикийг тэмдэглэв химилюминесценттунхууны пероксидаз, устөрөгчийн хэт исэл, люминолоос бүрдэх системд. Хүчтэй антиоксидант (аскорбины хүчил) болон дунд зэргийн антиоксидант (кверцетин) нь хэмжилтийн хугацаанд (10 минут) бүрэн исэлдүүлэхээр дээж дэх системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци ба эзэлхүүнийг сонгосон. Гэрлийн нийлбэрийн өөрчлөлтөд үндэслэн OAE-ийг тооцоолох аргыг санал болгож, үндэслэлтэй болгосон химилюминесцентургамлын дээж байгаа тохиолдолд. Кинетикийн шинжилгээ химилюминесцентсудлагдсан объектуудад флавоноид, сул антиоксидант (токоферол гэх мэт) зэрэг дунд зэргийн хүчтэй антиоксидантууд давамгайлж байгааг харуулсан. Судалгаанд хамрагдсан объектуудын тооцоолсон OAE утгууд болон тэдгээрийн химийн шинжилгээний өгөгдлүүдийг харьцуулж үзэхэд төрөл бүрийн харьцаатай ижил хэмжээний антиоксидант агуулсан бүтээгдэхүүн нь бие махбодийг чөлөөт радикалуудын хортой нөлөөллөөс хамгаалах чадвараараа ялгаатай болохыг харуулж байна. . Тайлбарласан техник нь янз бүрийн төрлийн антиоксидантуудын холимог агуулсан ургамлын объектыг судлахад ирээдүйтэй юм.

Холбоотой сэдвүүд химийн шинжлэх ухааны шинжлэх ухааны бүтээлүүд, шинжлэх ухааны бүтээлийн зохиогч - Георгий Константинович Владимиров, Е.В.Сергунова, Д.Ю.Измайлов, Ю.А.Владимров.

2016 / Георгий Владимиров, Сергунова Е.В., Измайлов Д.Ю., Владимиров Ю.А.
2,2"-азо-бис (2-амидинопропан) ашиглан идэвхжүүлсэн химилюминесценцээр антиоксидантыг тодорхойлох
2012 / Алексеев А.В., Проскурнина Е.В., Владимиров Ю.А.
Цитохром с-ээр катализлагдсан пероксидазын урвал дахь дигидрокерцетин ба рутины антиоксидант нөлөө
2008 / Демин Е.М., Проскурнина Е.В., Владимиров Ю.А.
Фентон урвалаар өдөөгдсөн химилюминесценцээр биологийн субстратын исэлдэлтийн болон антиоксидант чадварыг үнэлэх.
2016 он / Пискарев Игорь Михайлович, I.P. Иванова
Микропероксидаза-люминол системийг ашиглан сийвэнгийн липопротейн дэх липогидпероксидын агууламжийг тодорхойлох
2011 / Теселкин Юрий Олегович, Бабенкова Ирина Владимировна
Антиоксидант судлалын аргууд
2004 / Хасанов В.В., Рыжова Г.Л., Мальцева Е.В.
Тувагийн угсаатны анагаах ухаанд ашигладаг ургамлын антиоксидант үйл ажиллагаа
2012 / Чехани Н.Р., Теселкин Ю.О., Павлова Л.А., Козин С.В., Любитский О.Б.
Төрөл бүрийн биологийн туршилтын систем дэх Фоспренилийн антиоксидант шинж чанарыг судлах
2017 / А.В.Санин, А.Н.Наровлянский, А.В.Пронин, Т.Н.Кожевникова, В.Ю.Санина, А.Д.Агафонова
Төрөл бүрийн тунгийн полихлоржуулсан бифенилийн бүхэл цусны аяндаа болон иммуноглобулинаар өдөөгдсөн люминолоос хамааралтай хемилюминесценцийн төлөв байдалд үзүүлэх нөлөө
2016 / Габдулхакова И.Р., Каюмова А.Ф., Самоходова О.В.
Спектрофотометр ба химилюминесценцийн аргыг ашиглан чухал артерийн даралт ихсэх өвчтэй хүүхдүүдэд антиоксидант хамгаалалтын липидийн хэт исэлдэлтийн системийн үнэлгээ.
2014 / Натяганова Лариса Викторовна, Гаврилова Оксана Александровна, Колесникова Лариса Романовна

Эмийн ургамлын материал дахь нийт антиоксидант хүчин чадлыг химилюминесцентээр тодорхойлох

Эмийн ургамлын материал нь хүний биеийн антиоксидант эх үүсвэрийн нэг юм. Химилюминесценцийн шинжилгээ нь ургамлын гаралтай антиоксидантуудын агууламжийг тодорхойлох нийтлэг аргуудын нэг юм. Бидний ажилд уулын үнс, сарнай, долоогоно зэрэг жимсний декоциний, түүнчлэн бөөрөлзгөнө жимсний дусаахын нийт антиоксидант хүчин чадлыг (TAC) тодорхойлоход химилюминесценцийн шинжилгээг ашигласан. Туршилтаар тунхууны хэт исэл, устөрөгчийн хэт исэл, люминолоос бүрдэх системийн химилюминесценцийн кинетикийг тогтоосон. Хэмжилтийн явцад (10 минут) хүчтэй антиоксидантууд (аскорбины хүчил) ба дундаж хүчтэй антиоксидантууд (кверцетин) бүрэн исэлдүүлэхээр системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци, эзлэхүүнийг сонгосон. Ургамлын дээж байгаа үед химилюминесценцийн гэрлийн нийлбэрийн өөрчлөлтөд үндэслэн TAC тооцоолох аргыг санал болгож, үндэслэлтэй болгосон. Химилюминесценцийн кинетикийн дүн шинжилгээ нь судлагдсан объектуудад флавоноид ба сул антиоксидант (токоферол болон бусад) зэрэг дунд зэргийн хүчтэй антиоксидантууд давамгайлж байгааг харуулж байна. Судалгаанд хамрагдсан объектуудын TAC-ийн тооцоолсон утгууд болон тэдгээрийн химийн шинжилгээний өгөгдлүүдийг харьцуулах нь ижил хэмжээний антиоксидант агуулсан бүтээгдэхүүн нь төрөл бүрийн антиоксидантуудын янз бүрийн харьцаатай, чөлөөт радикалуудын хортой нөлөөллөөс биеийг хамгаалах чадвараараа ялгаатай болохыг харуулж байна. . Тодорхойлсон арга нь янз бүрийн төрлийн антиоксидантуудын холимог агуулсан ургамлын объектыг судлах ирээдүйтэй арга юм.

Шинжлэх ухааны ажлын текст "Эмийн ургамлын гаралтай нийт антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлох химилюминесцент арга" сэдвээр

эмийн ургамлын материалын нийт антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлох химилюминесцент арга

Г.К.Владимиров1^, Е.В.Сергунова2, Д.Ю.Измайлов1, Ю.А.Владимиров1.

1М.В.Ломоносовын нэрэмжит Москвагийн Улсын Их Сургуулийн Суурь Анагаах Ухааны факультетийн Анагаах ухааны биофизикийн тэнхим

2 Эм зүйн факультетийн фармакогнозын тэнхим,

И.М.Сеченовын нэрэмжит Москвагийн Улсын Анагаах ухааны анхны их сургууль, Москва

Эмийн ургамлын гаралтай материалууд нь хүний биед агуулагдах антиоксидантуудын нэг юм. Ургамлын объект дахь антиоксидантуудын агууламжийг тодорхойлох аргуудын дунд химилюминесценцийн шинжилгээний арга өргөн тархсан байдаг. Энэ ажилд туулай, сарнай, долоогоно жимсний декоциний болон бөөрөлзгөнө жимсний дусаахын нийт антиоксидант чадавхийг (TAC) үнэлэхэд ашигласан. Туршилтаар тунхууны хэт исэл, устөрөгчийн хэт исэл, люминолаас бүрдсэн системд химилюминесценцийн кинетикийг бүртгэсэн. Хүчтэй антиоксидант (аскорбины хүчил) болон дунд зэргийн антиоксидант (кверцетин) нь хэмжилтийн хугацаанд (10 минут) бүрэн исэлдүүлэхээр дээж дэх системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци ба эзэлхүүнийг сонгосон. Ургамлын дээж байгаа үед химилюминесценцийн гэрлийн нийлбэрийн өөрчлөлтөд үндэслэн OAE-ийг тооцоолох аргыг санал болгож, үндэслэлтэй болгосон. Химилюминесценцийн кинетикийн шинжилгээ нь судлагдсан объектуудад дунд зэргийн хүчтэй антиоксидантууд, түүний дотор флавоноид, сул антиоксидантууд (токоферол гэх мэт) давамгайлж байгааг харуулсан. Судалгаанд хамрагдсан объектуудын тооцоолсон OAE утгууд болон тэдгээрийн химийн шинжилгээний өгөгдлүүдийг харьцуулж үзэхэд төрөл бүрийн харьцаатай ижил хэмжээний антиоксидант агуулсан бүтээгдэхүүн нь бие махбодийг чөлөөт радикалуудын хортой нөлөөллөөс хамгаалах чадвараараа ялгаатай болохыг харуулж байна. . Тайлбарласан техник нь янз бүрийн төрлийн антиоксидантуудын холимог агуулсан ургамлын объектыг судлахад ирээдүйтэй юм.

Түлхүүр үгс: чөлөөт радикал, антиоксидант, антиоксидант үйл ажиллагаа, нийт антиоксидант хүчин чадал, хемилюминесценц, люмино

Санхүүжилт: уг ажлыг Оросын шинжлэх ухааны сан, 14-15-00375 тоот буцалтгүй тусламжаар дэмжсэн.

Ex3 Захидлын хувьд: Георгий Константинович Владимиров

119192, Москва, Ломоносовский пр-т, 31, 5-р байр; [имэйлээр хамгаалагдсан]

Өгүүлэл хүлээн авсан: 2016.03.10 Нийтлэлд хүлээн авсан: 2016.03.18

эмийн ургамлын материалын нийт антиоксидант хүчин чадлыг химилюминесцентээр тодорхойлох

1 Ломоносовын нэрэмжит Москвагийн Улсын Их Сургуулийн Суурь Анагаах Ухааны факультетийн Анагаах ухааны биофизикийн тэнхим, Москва, Орос

2 Эм зүйн факультетийн фармакогнозын тэнхим,

Сеченовын нэрэмжит Москвагийн Улсын Анагаахын Их Сургууль, Москва, Орос

Түлхүүр үг: чөлөөт радикал, антиоксидант, антиоксидант идэвхжил, нийт антиоксидант хүчин чадал, хемилюминесценц, люмино

Санхүүжилт: энэ ажлыг Оросын шинжлэх ухааны сангаас дэмжсэн, тэтгэлэг №. 14-15-00375.

Баярлалаа: Ломоносовын нэрэмжит Москвагийн Улсын Их Сургуулийн эрдэмтэн Андрей Алексеевт туршилт хийхэд тусалсанд зохиогчид талархаж байна. Захидал бичихдээ: Георгий Владимиров

Ломоносовский проспект, д. 31, к. 5, Москва, Орос, 119192; ur [имэйлээр хамгаалагдсан]Хүлээн авсан: 2016.03.10 Хүлээн авсан: 2016.03.18

Бие махбодид үүссэн чөлөөт радикалууд нь эсийн мембраны бүтцийг алдагдуулдаг бөгөөд энэ нь эргээд янз бүрийн эмгэгийн эмгэгийг хөгжүүлэхэд хүргэдэг. Радикалуудын хор хөнөөлтэй исэлдэлтийн нөлөөг биеийн антиоксидант хамгаалалтын систем урьдчилан сэргийлдэг бөгөөд үүнд бага молекул жинтэй нэгдлүүд - радикалыг таслан зогсоох бодис (хавх) чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. Антиоксидантуудын нэг эх үүсвэр бол эмийн ургамлын гаралтай материал, түүнчлэн тэдгээрт суурилсан эмүүд бөгөөд антиоксидант чадавхийг судлах нь тэдний урьдчилан сэргийлэх, эмчилгээний үр нөлөөг нэмэгдүүлэхэд тусалдаг.

Антиоксидантыг тодорхойлох үндсэн аргуудыг бүтээлүүдэд авч үзсэн боловч антиоксидантыг химийн нэгдлүүд гэж тодорхойлох нь судалж буй объектын хамгаалалтын шинж чанарын бүрэн дүр зургийг өгдөггүй: тэдгээр нь зөвхөн тодорхой антиоксидантуудын хэмжээгээр тодорхойлогддоггүй. гэхдээ бас тус бүрийн үйл ажиллагаагаар. Антиоксидант идэвхжил буюу антиоксидант идэвхжил, AOA нь антиоксидант чөлөөт радикал (kInH)-тай урвалын хурдны тогтмол юм. Хемилюминесценцийн (CL) арга нь дээж дэх антиоксидантыг холбодог радикалуудын нийт хэмжээг (антиоксидант нийт хүчин чадал, TCA) тодорхойлох боломжтой бөгөөд CL кинетикийн математик загварчлалын аргыг ашиглахдаа мөн үүсэх хурд, урвалын хурдыг тодорхойлох боломжийг олгодог. антиоксидант бүхий радикалууд, өөрөөр хэлбэл AOA.

Нийт антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлох химилюминесценцийн аргын хамгийн түгээмэл өөрчлөлт нь люминолыг химилюминесценцийн идэвхжүүлэгч болгон ашиглахад суурилдаг. Люминол, устөрөгчийн хэт исэл, аяндаа задрах (термолиз) -ын үр дүнд радикал үүсгэх чадвартай нэгдэл, жишээ нь 2,2"-азобис-(2-амидинопропан) дигидрохлорид (ABAP) нэмсэн дээж:

Молекулын хүчилтөрөгч байгаа үед R^ алкил радикал нь пероксил радикал ROO^ үүсгэдэг.

ROO^ + LH2 ^ ROOH + LHv LH-ээс завсрын бодис (люминолын гидропероксид ба люминолын эндопероксид) үүсэх замаар люминолын исэлдэлтийн эцсийн бүтээгдэхүүн болох аминофталийн хүчлийн молекул электрон өдөөгдсөн төлөвт үүсдэг ба энэ нь фотон ялгаруулдаг. , үр дүнд нь химилюминесценц ажиглагдаж байна. CL-ийн эрчим нь фотоны үйлдвэрлэлийн хурдтай пропорциональ бөгөөд энэ нь эргээд систем дэх LH-ийн суурин концентрацитай пропорциональ байна. Радикалуудтай харилцан үйлчлэлцсэнээр антиоксидантууд нь тайлбарласан өөрчлөлтийн гинжин хэлхээг тасалдуулж, фотон үүсэхээс сэргийлдэг.

Термолизэнд өртөмтгий нэгдлүүд нь химилюминесценцийн аргыг ашиглан дээжийн антиоксидант хүчин чадлыг шинжлэхэд радикалуудын цорын ганц боломжит эх үүсвэр биш юм. Альтернатив хувилбарууд нь тунхууны пероксидаза-устөрөгчийн хэт исэл, гемин-устөрөгчийн хэт исэл, цитохром с-кардиолипин-устөрөгчийн хэт исэл гэх мэт. Пероксидазаар люминолыг исэлдүүлэх урвалын схемийг Кормье нар хийсэн ажилд авч үзсэн болно. .

Эдгээр системүүдийн CL кинетик муруй нь урвалын хоёр үе шатыг тусгадаг: CL эрчмийг нэмэгдүүлэх үе шат, өндөрлөгийн үе шат эсвэл гэрэлтэлтийн аажмаар буурах үе шат.

CL-ийн эрчим нь тогтмол эсвэл аажмаар буурдаг. Уг ажил нь муруйнуудын энэ онцлогийг харгалзан нийт антиоксидант хүчин чадлыг хэмжих хоёр аргыг тайлбарласан болно. TRAP (Total Reactive Antioxidant Potential) арга нь CL t-ийн далд үеийг хэмжихэд суурилдаг бөгөөд Trolox эсвэл аскорбины хүчил зэрэг антиоксидантуудыг тодорхойлоход ашиглаж болно: тэдгээр нь радикалуудтай урвалын хурдны тогтмол тогтмол байдгаараа онцлогтой бөгөөд ийм шалтгаанаар байж болно. хүчтэй антиоксидант гэж нэрлэдэг. Нууц үед тэдний бүрэн исэлдэлт үүсдэг. TAR (Нийт антиоксидант урвалын) аргыг тэгш өндөрлөгт буюу хамилюминесцентийн муруйны дээд тал нь q-ийн химилюминесценцийн бөхөөх түвшинг хэмжихэд ашигладаг.

Энд I нь антиоксидантгүй химилюминесценцийн эрчим, 11 нь антиоксидант байгаа үеийн CL эрчмийг илэрхийлнэ. Хэрэв систем нь люминолын тогтмолтай харьцуулахад радикалуудтай харилцан үйлчлэлийн бага хурдтай, сул антиоксидант агуулдаг бол энэ аргыг хэрэглэнэ.

Антиоксидантуудын нөлөө нь зөвхөн t ба c үзүүлэлтээр тодорхойлогддоггүй. Бүтээлүүдээс харахад гемин-H2O2-luminol систем дэх шээсний хүчил эсвэл цитохром с-кардиолипин-H2O2-люминолын систем дэх токоферол, рутин, кверцетин зэрэг антиоксидантуудын нөлөө нь хамгийн их хурдны өөрчлөлтөөр тодорхойлогддог. CL (utx)-ийн өсөлт. Кинетикийн математик загварчлалын үр дүнгээс харахад эдгээр антиоксидантуудын радикалуудтай харилцан үйлчлэлийн хурдны тогтмолуудын утгууд нь люминолын тогтмолын утгатай ойролцоо байдаг тул ийм антиоксидантуудыг дунд зэргийн хүчтэй антиоксидант гэж нэрлэж болно.

Хэрэв судалж буй материал, ялангуяа ургамлын гаралтай түүхий эд нь зөвхөн нэг төрлийн антиоксидант агуулсан байвал тэдгээрийн агуулгыг дээр дурдсан гурван үзүүлэлтийн аль нэгээр нь тодорхойлж болно (t, c эсвэл V). Гэхдээ ургамлын материал нь янз бүрийн хүчтэй антиоксидантуудын холимог агуулдаг. Энэ асуудлыг шийдэхийн тулд зарим зохиогчид томъёогоор тооцоолсон DE тодорхой хугацааны туршид химилюминесценцийн гэрлийн нийлбэрийн өөрчлөлтийг ашигласан.

DE = DE0 - DE,

DE0 ба DE5 нь тухайн хугацааны CL гэрлийн нийлбэр хаана байна вэ? хяналтын болон туршилтын дээжинд тус тус . Систем дэх бүх антиоксидантуудын исэлдэлт, өөрөөр хэлбэл туршилтын дээжийн CL муруй нь хяналтын дээжийн CL муруйны түвшинд хүрэхэд хангалттай хугацаа байх ёстой. Сүүлийнх нь судлаачид зөвхөн гэрлийн гэрлийн нийлбэрийг бүртгэхээс гадна CL кинетик муруйг хангалттай удаан хугацаанд бүртгэх ёстой гэж үздэг бөгөөд энэ нь үргэлж хийгддэггүй.

Бүх хэмжсэн параметрүүд нь төхөөрөмж болон хэмжилтийн нөхцлөөс хамаардаг тул судалж буй систем дэх бодисын антиоксидант нөлөөг ихэвчлэн стандарт антиоксидант, жишээлбэл Trolox-ийн нөлөөтэй харьцуулдаг.

Тунхууны пероксидаз-устөрөгчийн хэт ислийн системийг олон зохиогчид ургамлын материалын нийт антиоксидант хүчин чадлыг шинжлэхэд ашигласан. Дээж дэх антиоксидантуудын хэмжээг тооцоолохын тулд CL-ийн далд үеийг (TRAP арга) ашигласан бөгөөд CL-ийн хөгжлийн муруйн доорх талбайг уг ажилд ашигласан. Гэсэн хэдий ч жагсаасан бүтээлүүд нь тодорхой үндэслэлийг өгдөггүй

OAU-г үнэлэх нэг буюу өөр параметрийн сонголт.

Судалгааны зорилго нь янз бүрийн төрлийн антиоксидантуудын харьцаа TOA-д хэрхэн нөлөөлж байгааг тодорхойлох, ургамлын материал дахь TOA-ийг илүү нарийвчлалтай тодорхойлохын тулд химилюминесценцийн аргыг өөрчлөх явдал байв. Үүний тулд бид хэд хэдэн үүрэг даалгавар өгсөн. Эхлээд судлагдсан объектуудын CL кинетикийг гурван төрлийн (хүчтэй, дунд, сул) стандарт антиоксидантуудын кинетиктэй харьцуулж, аль төрлийн антиоксидант нь судлагдсан объектуудын OAU-д гол хувь нэмэр оруулж байгааг ойлгох хэрэгтэй. Хоёрдугаарт, эдгээр объектын нөлөөн дор CL гэрлийн нийлбэрийн бууралтыг OAE-д хамгийн их хувь нэмэр оруулдаг антиоксиданттай харьцуулан хэмжих замаар судалж буй объектуудын OAE-ийг тооцоол.

МАТЕРИАЛ БА АРГАЧЛАЛ

Судалгааны объект нь Красногорсклексредства (Орос) ХК-ийн үйлдвэрлэсэн долоогоно, сарнай, сарнайн хонго зэрэг ургамлын дээжүүд, түүнчлэн байгалийн өсөлтийн нөхцөлд Москва мужаас зохиогчдын цуглуулж, 60-80 хэмийн температурт хатаасан бөөрөлзгөнө жимс байв. C дарагдсан үед шүүс, хэв гажилтыг гаргахаа болих хүртэл.

Химилюминесцент аргыг ашиглан антиоксидант хүчин чадлыг шинжлэх урвалжууд нь: KH2PO4, 20 мМ буферийн уусмал (рН 7.4); тунхууны үндэснээс пероксидаза (үйл ажиллагаа 112 нэгж / мг, M = 44,173.9), 1 мМ усан уусмал; luminol (5-амин-1,2,3,4-тетрагидро-1,4-фталазиндион, 3-аминофтал хүчил гидразид, M = 177.11), 1 мМ усан уусмал; устөрөгчийн хэт исэл (H2O2, M = 34.01), 1 мМ усан уусмал; антиоксидантуудын уусмал (аскорбины хүчил, кверцетин, токоферол). Бүх урвалжуудыг Sigma Aldrich (АНУ) үйлдвэрлэдэг.

Долоогонын, сарнайн, сарнайн жимсний декоциний, бөөрөлзгөнө жимсний дусаахыг ЗХУ-ын Улсын фармакопейн аргын дагуу "Дусаах, декоциний" гэсэн ерөнхий фармакопейн нийтлэлд заасан аргын дагуу бэлтгэсэн.

Нийт антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлохдоо PowerGraph 3.3 программ хангамжийг ашиглан Lum-100 хемилюминометр (DISoft, Орос) дээр химилюминесценцийг бүртгэсэн. Ургамлын материалд OAE-ийг тодорхойлохын тулд 40 мкл люминолыг 1 мМ концентрацитай, 40 мкл тунхууны пероксидазыг 0.1 мкМ концентрацитай, 10-50 мкл декоциний буюу дусаах (концентрациас хамаарч) ба фосфатын буфер. Дээжний нийт хэмжээг 1 мл болгохын тулд шаардлагатай хэмжээг төхөөрөмжийн кюветт хийнэ. Кюветтийг төхөөрөмжид суулгаж, арын дохиог ажиглан CL-ийг тэмдэглэв. Суурь дохиог бүртгэсний дараа 48 секундын дараа кюветт 1 мМ концентрацитай 100 мкл H2O2 нэмж, CL бичлэгийг 10 минутын турш үргэлжлүүлэв. Ургамлын объект тус бүрээс өөр өөр концентрацитай дөрвөн дээж бэлтгэсэн. Мөн CL-ийг аскорбины хүчил, кверцетин, токоферол зэрэг антиоксидант тус бүрийн таван өөр концентрацид бүртгэсэн. Дараа нь декоциний болон дусаах дээжийн OAU-ийг кверцетин болгон дахин тооцоолсон.

Луминол, тунхууны хэт исэл ба устөрөгчийн хэт ислийн концентрацийг эмийн ургамлын гаралтай усан хандын антиоксидант хүчин чадлыг зөвшөөрөгдөх хугацаанд (10 минутаас илүүгүй) тодорхойлохын тулд сонгосон. Энэ хугацаанд аскорбатын антиоксидант ба флавоноид кверцетин (ургамлын материалын гол антиоксидант) -ын химилюминесценцийн муруйнууд.

өндөрлөгт хүрсэн нь систем дэх антиоксидантуудыг бүрэн устгаж байгааг харуулж байна. Судалгаанд хамрагдсан дээжийн шингэрүүлэлт ба стандарт антиоксидант уусмалын концентрацийг (зураг дээрх тайлбарт заасан) бүх CL кинетик муруйг төхөөрөмжийн ижил мэдрэмжээр хэмжихээр сонгосон.

Антиоксидант хүчин чадлыг антиоксидант агуулсан бодис нэмэхэд химилюминесценцийн (гэрлийн нийлбэр) кинетик муруйн доорх талбайн өөрчлөлтөөс (AS) тооцсон. Үүнийг хийхийн тулд бид антиоксидантгүй системийн S0-ийг тооцоолж, үүнээс антиоксидант нэмсэн системийг тодорхойлдог SS талбайг хасав. AS-ийн утга нь хемилюминометрийн мэдрэмж болон хэмжилтийн нөхцлөөс хамаарна. AS/C ■ V харьцаа (энд C нь кюветт дэх судалж буй биологийн материалын концентраци, г/л, V нь кюветийн эзэлхүүн, l) нь судлагдсан материалын 1 г антиоксидант чадварыг илэрхийлдэг. өөрөөр хэлбэл, ургамлын түүхий эд.

Үүнтэй адилаар бид ижил эзэлхүүнтэй урвалын холимогт байрлуулсан стандарт антиоксидант, жишээлбэл, кверцетин уусмалын антиоксидант ASa-ийн хэмжээг тооцоолсон. AS/CÄ ■ V харьцаа (энд CA нь кюветт дэх антиоксидант жингийн концентраци, г/л) нь 1 г антиоксидантын антиоксидант чадварыг илэрхийлдэг.

Стандарт антиоксидант бүрийн хувьд хэд хэдэн концентрацитай уусмалаас ирсэн дохиог бүртгэж, тооцоолол нь шугаман хамаарал дотор байгаа бөгөөд олж авсан үр дүн нь давтагдах боломжтой байх болно. Үнэн хэрэгтээ концентраци дээрх дохионы шугаман хамаарлыг (ASa = kA ■ CA) олж авсан бөгөөд үүнээс kA стехиометрийн коэффициентийг тооцоолсон. Фишерийн шалгуурын дагуу стандарт антиоксидантыг олж авсан kA утга нь 0.975 магадлал бүхий статистикийн ач холбогдолтой юм. Дараа нь дөрвөн концентрацийн дохиог дөрвөн ургамлын дээж тус бүрээр бүртгэж, бүх дээжийн хувьд концентрациас дохионы шугаман хамаарлыг олж авсан (AS = k ■ C), үүнээс k стехиометрийн коэффициентийг тооцоолсон. 0.975 (Фишерийн тест) магадлалтай бол ургамлын дээжээс авсан k утга нь статистикийн хувьд чухал юм. Ургамлын материалын нийт антиоксидант хүчин чадлыг стандарт антиоксидант (мг%) массын хувьд томъёог ашиглан олов.

OAE = k ■ 105. k

Утгыг арифметик дундаж ± стандарт хазайлт (M ± 5) p дээр үзүүлэв.<0,05.

СУДАЛГААНЫ ҮР ДҮН

Натрийн аскорбатын оролцоотойгоор химилюминесценцийн кинетикийн судалгаа (Зураг 1) нь энэхүү антиоксидант нь CL бараг бүрэн дарагдсан далд үеээр тодорхойлогддог болохыг харуулсан. Түүний үргэлжлэх хугацаа нь систем дэх антиоксиданттай пропорциональ байна. Энэ тохиолдолд CL муруйн налуу болон тэгш өндөрлөг дээрх CL эрчимжилт өөрчлөгдөхгүй. Үүнийг аскорбины хүчил нь системд үүссэн бүх радикалуудыг, тэр дундаа люминолын радикалуудыг саатуулдаг хүчтэй антиоксидант бөгөөд бүх аскорбат исэлдэх хүртэл CL үүсдэггүйтэй холбон тайлбарладаг.

Токоферолын нөлөө (Зураг 2) нь өндөрлөг газар дахь CL-ийн эрчмийг бууруулснаар илэрсэн бөгөөд энэ нь сул антиоксидантуудын хувьд ердийн зүйл боловч токоферол нь хамгийн их нөлөө үзүүлдэг.

хүчтэй антиоксидант. Магадгүй энэ зөрүү нь бидний туршилтанд чөлөөт радикалууд усан уусмалд байсантай холбоотой байж болох юм, харин токоферолын нөлөөг ихэвчлэн туйлтгүй орчинд судалдаг. Радикалуудын эх үүсвэр нь кардиолипинтэй цитохром С-ийн нэгдэл бөгөөд энэ цогцолбор дотор люминолын урвал явагдсан судалгаанд токоферол нь дунд зэргийн антиоксидант шинж чанартай байсан.

Кверцетиний янз бүрийн концентрацийн бидний системд үзүүлэх нөлөөг (Зураг 3) судалж, түүний кинетик муруй ба натрийн аскорбат ба токоферолыг харьцуулж үзээд кверцетиний гол нөлөө нь налуугийн өөрчлөлтөөр илэрдэг болохыг тэмдэглэж болно. муруй, өөрөөр хэлбэл, дунд зэргийн хүчтэй антиоксидантуудын хувьд ердийн CL-ийн хөгжлийн хурд.

Бүх судлагдсан декоциний CL муруйнууд (Зураг 4) төгсгөлд нь CL-ийн эрчим бага зэрэг буурч, өөрөөр хэлбэл, хүрэх үед кверцетинийн муруйтай төстэй.

Цаг, мин

Цагаан будаа. 1. Хемилюминесценцийн кинетикт натрийн аскорбат үзүүлэх нөлөө

Системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци: luminol - 40 μM, тунхууны хэт исэл - 4 нМ, устөрөгчийн хэт исэл - 100 μM. Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.05 мкм; 3 - 0.10 мкМ; 4 - 0.15 мкм; 5 - 0.2 мкм; 6 - 0.25 мкМ натрийн аскорбат.

өндөрлөг. Ажилд харуулсанчлан энэ зан үйл нь дунд зэргийн хүчтэй антиоксидантуудад түгээмэл байдаг бөгөөд үүнд манай тохиолдолд полифенолууд - флавоноид ба таннин орно. Бөөрөлзгөнө жимсийг дусаахын тулд (Зураг 4, D), энэ тохиолдолд токоферол гэх мэт сул антиоксидантуудын хувьд тэгш өндөрлөгийн түвшинд химилюминесценцийн мэдэгдэхүйц бууралт ажиглагдаж байна. Кверцетин ба токоферолын хувьд бөөрөлзгөнө дусаах нь 4.7 ± 0.9 мкмоль/г кверцетин, 11.9 ± 0.8 мкмоль/г токоферол агуулдаг.

Ургамлын гаралтай дөрвөн судлагдсан усан хандын өөр өөр концентрацид авсан химилюминесценцийн муруйг харьцуулж үзэхэд дээжийн нийт антиоксидант хүчин чадалд дунд болон сул антиоксидантуудын хувь нэмэр дараах цувралд буурсан болохыг харуулсан: бөөрөлзгөнө жимсний дусаалга (Зураг 4). , D), сарнайн хип декоциний (Зураг 4, B), Rowan жимсний декоциний (Зураг 4, А), долоогоно жимсний декоциний (Зураг 4, B). Кюветт дэх судлагдсан бодисын C концентрацид суурилсан AS утгууд ба кверцетин дэх нийт антиоксидант хүчин чадлын утгыг хүснэгтэд үзүүлэв.

ҮР ДҮНГИЙН ХЭЛЭЛЦҮҮЛЭГ

Туршилтын явцад олж авсан өгөгдөл, тэдгээрийн үндсэн дээр тооцоолсон судлагдсан объектуудын OAE утгыг тэдгээрийн доторх гол антиоксидантуудын агууламжтай харьцуулж, химийн шинжилгээний аргыг ашиглан тодорхойлсон. Янз бүрийн объект дахь антиоксидант ба TAU-ийн нийт хэмжээ хоорондын эерэг хамаарал нь маргаангүй байгаа хэдий ч эдгээр үзүүлэлтүүдийн хооронд мэдэгдэхүйц ялгаа байсаар байна. Жишээлбэл, хэрэв бид флавоноид, таннин, аскорбины хүчлийн агууламжийн нийлбэрийг авбал долоогоно жимсний декоциний (хүснэгт) -ээс бусад бүх судлагдсан объектын тооцоолсон TAU-аас их байх болно.

Бусад судлаачид химийн шинжилгээний үр дүн болон химилюминесцент аргаар тодорхойлсон TAU утга нь ихэвчлэн давхцдаггүй болохыг харуулсан. Ашиглалтын явцад нийт антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлсон

46 Цаг, мин

Би" "х чи----.

Цагаан будаа. 2. Токоферолын химилюминесценцийн кинетикт үзүүлэх нөлөө

Системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци: luminol - 40 μM, тунхууны хэт исэл - 4 нМ, устөрөгчийн хэт исэл - 100 μM. Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.01 мкм; 3 - 0.025 мкм; 4 - 0.06 мкм; 5 - 0.1 мкм; 6-0.2 мкм токоферол.

46 Цаг, мин

Цагаан будаа. 3. Хемилюминесценцийн кинетик дээр кверцетин үзүүлэх нөлөө Системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци: luminol - 40 μM, тунхууны хэт исэл - 4 нМ, устөрөгчийн хэт исэл - 100 мкМ. Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.02 мкм; 3 - 0.03 мкм; 4 - 0.04 мкм; 5 - 0.05 мкм; 6 - 0.06 мкМ кверцетин.

Цаг, мин

46 Цаг, мин

120 I 100 80\60 40 20

46 Цаг, мин

Цагаан будаа. 4. Химилюминесценцийн кинетикт эгнэсэн жимс (А), долоогоно (В), сарнайн хонго (C) ба бөөрөлзгөнө жимсний (D) дусаах декоциний нөлөөлөл Системийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци: люминолын - 40 мкМ, тунхууны пероксидаза - 4 nM, устөрөгчийн хэт исэл - 100 мкМ . (A) Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.002 г / л; 3 - 0.004 г / л; 4 - 0.006 г / л; 5 - 0.008 г/л туулайн жимсний декоциний. (B) Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.005 г / л; 3 - 0.0075 г / л; 4 - 0.01 г / л; 5 - 0.0125 г/л долоогоно жимсний декоциний. (B) Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.001 г / л; 3 - 0.0015 г / л; 4 - 0.002 г / л; 5 - 0.0025 г/л сарнайн декоциний. (D) Муруй: 1 - хяналтын дээж; 2 - 0.001 г / л; 3 - 0.003 г / л; 4 - 0.004 г / л; 5 - 0.005 г/л бөөрөлзгөнө жимс дусаах.

пероксидаза-люминол-устөрөгчийн хэт ислийн системд тритерпенийн нэгдлүүдийн агууламжтай хамааралтай. Гэсэн хэдий ч судалгааны объект нь өөр ургамал байсан ижил зохиогчдын ажилд тэд OAE-ийн аль ч бүлгийн бодис, түүний дотор флавоноидуудын агууламжтай хамаарлыг ажиглаагүй байна.

Ийм зөрүү нь дор хаяж гурван хүчин зүйлтэй холбоотой байдаг. Нэгдүгээрт, антиоксидантуудын идэвхжил, тухайлбал, тэдгээрийн радикалуудтай харилцан үйлчлэх хурд нь чухал бөгөөд энэ нь ургамлын дээжинд багтсан янз бүрийн антиоксидантуудын хувьд өөр өөр байдаг. Измайловын хэлснээр, мексидол, токоферол, кверцетин зэрэгтэй харгалзах урвалын хурдны тогтмолууд нь 0.04: 2: 60 байна. Хоёрдугаарт, химийн урвалд орж буй антиоксидант молекул бүр өөр өөр тооны радикалуудыг саатуулж чаддаг. Ажлын дагуу кверцетин, шээсний болон аскорбины хүчлүүд нь урвалд орсон антиоксидант молекул тутамд 3.6 ± 0.1, 1.4 ± 0.1 ба 0.5 ± 0.2 радикалыг саатуулдаг (гемин-H2O2-luminol системийг ашигласан). Гуравдугаарт, судалгааны үр дүнд ажлын нэгэн адил ургамлын дээжинд пероксидазын идэвхжил, түүнчлэн дээжинд кальци байгаа нь нөлөөлж болох бөгөөд энэ нь ажилд үзүүлсэн шиг. тодорхой нөхцөлд тунхууны пероксидазын үйл ажиллагаа. Энэ нь ихэвчлэн илүү их зүйлд хүргэдэг

тэгш өндөрлөгт хяналтын муруйгаас илүү өндөр CL эрчимтэй байсан ч бид үүнийг ажиглаагүй байна.

Эхний хүчин зүйл нь гэрлийн нийлбэрийн өөрчлөлт гэх мэт параметрийн хэрэглээг эрс хязгаарладаг, учир нь химилюминесценцийг хэмжих хугацаа нь туршилтын дээж дэх бүх антиоксидантыг хэрэглэх хугацаанаас урт байх ёстой. Энэ мөч үүсэхийг зөвхөн химилюминесценцийн кинетикийг хэмжих замаар шүүж болно. Нэмж дурдахад сул антиоксидантуудын OAU-д оруулах хувь нэмрийг эрс дутуу үнэлдэг, учир нь тэдгээрийн бүрэн исэлдэх хугацаа нь хэмжилтийн зөвшөөрөгдөх хугацаанаас (10-20 минут) хэд дахин урт байдаг.

Антиоксидантын стехиометрийн коэффициент нь илүү чухал юм. Түүгээр таслагдсан n радикалуудын тоо тэнцүү байна

Энд p нь стехиометрийн коэффициент, Am нь хэмжилтийн хугацааны туршид антиоксидант концентрацийн өөрчлөлт, манай тохиолдолд туршилтын дээжин дэх шинжилгээний бодисын анхны концентраци юм.

Антиоксидант байхгүй ба түүний оршихуйн гэрэлтэлтийн гэрлийн нийлбэрийн зөрүү нь n-тэй пропорциональ байна.Таслагдсан радикалуудын нийт тоо n = Y.p-тэй тэнцүү байна. м,

Энд тодорхой антиоксидантын стехиометрийн коэффициент, m нь хэмжилтийн явцад түүний концентраци юм

Судалгааны объект Флавоноид, мг%* Таннин, мг%* Аскорбины хүчил, мг%* AS/C ■ 10-8, arb. нэгж TAU, мг% кверцетин

Rowan жимсний декоциний 8.87 ± 0.01 210.00 ± 10.00 0.67 ± 0.02 7.13 ± 0.96 56.53 ± 7.61

Сарнайн декоциний 4.66 ± 0.04 850.00 ± 20.00 3.70 ± 0.12 16.60 ± 3.40 131.63 ± 27.26

Долоогонын жимсний декоциний 3.01 ± 0.06 12.00 ± 3.00 0.23 ± 0.002 3.18 ± 0.29 25.20 ± 2.32

Хатаасан бөөрөлзгөнө жимсний дусаах 90.00 ± 4.00 40.00 ± 20.00 3.91 ± 0.08 6.65 ± 1.21 52.69 ± 9.56

Жич: * - уран зохиолын өгөгдөл, . AS - дээжийн гэрлийн нийлбэрийн өөрчлөлт, rel. нэгж, С - кювет дэх дээжийн концентраци, г/л. Тооцоолсон утгууд нь p дээр найдвартай байна<0,05. Число измерений для каждого образца - четыре.

Рениа. Баривчлагдсан радикалуудын нийт тоо нь антиоксидантуудын нийт хэмжээтэй тэнцэхгүй нь гарцаагүй, учир нь pt коэффициентүүд нь нэгдмэл утгатай төдийгүй өөр өөр антиоксидантуудын хувьд мэдэгдэхүйц ялгаатай байдаг.

n-ийн утга нь антиоксидант агуулсан дээж болон антиоксидант агуулаагүй хяналтын дээжийн хооронд тодорхой хугацаанд хэмжсэн гэрлийн нийлбэрийн зөрүүтэй пропорциональ байна.

Энд k нь хэмжилтийн ижил нөхцөлд тогтмол байх коэффициент юм.

Нийтлэлд авч үзсэн арга нь нийт антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлох боломжийг олгодог бол химийн шинжилгээ нь бүтээгдэхүүн дэх антиоксидантуудын нийт агууламжийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Тиймээс химилюминесценцийн арга нь химийн шинжилгээнээс илүү мэдээлэл сайтай юм шиг санагддаг.

Бид тунхууны хэт исэл, устөрөгчийн хэт исэл ба люминол (бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн концентраци - 4 нМ, 100 мкМ ба 40 мкМ; 20 ммфосфат тус тус) -ээс бүрдсэн систем дэх химилюминесценцийн кинетикийг бүртгэх замаар ургамлын түүхий эдийн нийт антиоксидант хүчин чадлыг үнэлэх нөхцөлийг сонгосон. буфер, рН 7.4),

10 минутын дотор хүчтэй антиоксидант (аскорбины хүчил) болон дунд зэргийн антиоксидант (кверцетин) исэлдэлтийг баталгаажуулсан. Энэхүү хэмжилтийн хугацаа нь тохиромжтой бөгөөд шаардлагатай хэмжилтийн чанарыг баталгаажуулдаг.

Химилюминесценцийн кинетикийн дүн шинжилгээ нь судлагдсан объектуудад (эрүүл жимсний декоциний, сарнайн хонго, долоогоно, бөөрөлзгөнө жимсний дусаалга) гол антиоксидантууд нь дунд зэргийн хүчтэй антиоксидант, түүний дотор флавоноид, сул хүч (токоферол гэх мэт) болохыг харуулж байна. Химилюминесценцийн гэрлийн нийлбэрийн бууралт дээр үндэслэн судлагдсан объектуудын нийт антиоксидант хүчин чадлыг тооцоолсон. Хүлээн авсан TAU утгыг химийн шинжилгээний үр дүнтэй харьцуулах нь өөр өөр харьцаатай ижил хэмжээний антиоксидант агуулсан бүтээгдэхүүн нь бие махбодийг чөлөөт радикалуудын хортой нөлөөллөөс үр дүнтэй хамгаалах чадвараараа ялгаатай болохыг харуулж байна. Тайлбарласан техник нь янз бүрийн антиоксидантуудын холимог агуулсан ургамлын объектыг судлахад ирээдүйтэй юм. Үүний зэрэгцээ судалгааны энгийн, хямд өртөгтэй гэдгээрээ онцлог юм. Хемилюминесценцийн кинетикийг хэмжих урвалын математик загварчлалтай хослуулах нь TAU-ийг тодорхойлох үйл явцыг автоматжуулахаас гадна антиоксидантуудын бие даасан бүлгүүдийн үзүүлэлтэд оруулах хувь нэмрийг тодорхойлох болно.

Уран зохиол

1. Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. Чөлөөт радикалууд зохицуулалтын болон эмгэг процесст оролцогчид. Үүнд: Григорьев А.И., Владимиров Ю.А., редакторууд. Суурь шинжлэх ухаан - анагаах ухаан. Биофиз. зөгийн бал. технологи. М.: MAX Press; 2015. боть 1. х. 38-71.

3. Хасанов В.В., Рыжова Г.Л., Мальцева Е.В. Антиоксидантыг судлах арга. Хими. rast. түүхий эд. 2004; (3): 63-75.

4. Vasiliev R. F., Kancheva V. D., Fedorova G. F., Butovska D. I., Trofimov A. V. Хальконуудын антиоксидант үйл ажиллагаа. Урвалж ба завсрын бүтээгдэхүүний энерги, бүтцийн реактивийг химилюминесцентээр тодорхойлох, квант химийн тооцоо. Кинетик ба катализ. 2010; 51 (4): 533-41.

6. Федорова Г.Ф., Трофимов А.В., Васильев Р.Ф., Вепринцев Т.Л.. Перокси-

Радикал зуучлагдсан химилюминесцент: механик олон янз байдал ба антиоксидант шинжилгээний үндэс. Аркивок. 2007; 8: 163-215.

8. Бастос ЭЛ, Ромофф П, Эккерт CR, Баадер В.Ж. H2O2-геминээр өдөөгдсөн люминолын химилюминесценцээр антирадикал чадавхийг үнэлэх. J Agric Food Chem. 2003 оны арванхоёрдугаар сарын 3; 51 (25): 7481-8.

9. Владимиров Ю.А., Проскурнина E. V. Чөлөөт радикалууд ба эсийн химилюминесценц. Успэхи биол. хим. 2009; 49: 341-88.

10. Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В., Измайлов Д.Ю.Кинетик хемилюминесценцийг чөлөөт радикалуудын урвалыг судлах арга болгон. Биофизик. 2011; 56 (6): 1081-90.

11. Измайлов Д.Ю., Демин Е.М., Владимиров Ю.А. Хемилюминесценцийн кинетикийг хэмжих замаар антиоксидант идэвхийг тодорхойлох. Фотобиологи ба фото анагаах ухаан. 2011; 7 (2): 70-6.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. 2.2"-Азо-бис(2-амидинопропан) термолизийн нөлөөгөөр люминолын гэрэлтэлт. Үнэгүй.

Radic Res Commun. 1992; 17 (5): 299-311.

13. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. SOD-ийн үйл ажиллагааг үнэлэхийн тулд люминолын гэрэлтэлтийг унтраах аргыг ашиглах тухай. Чөлөөт Радик Биол Мед. 1994 оны 6-р сар; 16 (6): 833-7.

15. Lissi EA, Salim-Hanna M, Pascual C, Del Castillo MD. Люминолоор сайжруулсан химилюминесценцийн хэмжилтээс нийт антиоксидант потенциал (TRAP) болон нийт антиоксидант урвалын үнэлгээ. Чөлөөт Радик Биол Мед. 1995 оны хоёрдугаар сар; 18 (2): 153-8.

17. Cormier MJ, Prichard PM. Зогсоосон урсгалын техникээр люминолын гэрэлтэгч хэт исэлдүүлэх механизмын судалгаа. J Biol Chem. 1968 оны есдүгээр сарын 25; 243 (18): 4706-14.

21. Алексеев А.В., Проскурнина Е.В., Владимиров Ю.А. 2,2"-азо-бис(2-амидинопропан) ашиглан идэвхжүүлсэн химилюминесценцээр антиоксидантыг тодорхойлох. Вестн. MGU. Сер. 2. Хем 2012;53(3): 187-93.

24. ЗХУ-ын Эрүүл Мэндийн Яам ЗХУ-ын Улсын Фармакопея XI хэвлэл. Боть. 2 “Шинжилгээний ерөнхий аргууд. Эмийн ургамлын түүхий эд." М .: Анагаах ухаан; 1987. х. 147-8.

25. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Kornyushina M. A. Rosehip олборлох бэлдмэлийн судалгаа. Эмийн сан. 2012; (2): 14-6.

26. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Avrach A. S. Хадгалах, усан аргаар олборлох янз бүрийн аргыг ашиглан долоогоно жимсийг судлах. Эмийн сан. 2010; (5): 16-8.

27. Avrach A. S., Sergunova E. V., Kuksova Ya. V. Жимсний биологийн идэвхт бодис, энгийн бөөрөлзгөнө усан ханд. Эмийн сан. 2014; (1): 8-10.

28. Avrach A. S., Samylina I. A., Sergunova E. V. Долоогонын жимсний биологийн идэвхт бодисын судалгаа - гомеопатик матрицын хандмал бэлтгэх түүхий эд. Бямба гарагт. шинжлэх ухааны tr. XXIV Москвагийн материал дээр үндэслэсэн. олон улсын гомеопатист. conf. "Орчин үеийн анагаах ухаанд гомеопатик аргыг хөгжүүлэх"; 2014 оны 1-р сарын 24-25; Москва. М.; 2014. х. 146-7.

29. Сергунова Е.В., Сорокина А.А. Хадгалах янз бүрийн аргын эмийн ургамлын түүхий эд дэх биологийн идэвхт бодисын найрлагын судалгаа. Бямба гарагт. XX Ross-ийн материал дээр үндэслэсэн дипломын ажил. үндэсний конгр. "Хүн ба анагаах ухаан"; 2013 оны дөрөвдүгээр сарын 15-19; Москва. М .: EKOOnis; 2013. х. 184-90.

30. Александрова Е.Ю., Орлова М.А., Нейман П.Л. Тунхууны үндэслэг иш, үндэснээс гаргаж авсан ханд дахь пероксидазын идэвхжил, янз бүрийн нөлөөнд тэсвэртэй байдлын судалгаа. Vestn. Москвагийн улсын их сургууль. Сэр. 2. Хими. 2006; 47 (5): 350-2.

1. Проскурнина Е.В., Владимиров ЮА. Свободные радикалы как участники регуляторных и патологических процесов. Үүнд: Григорьев А.И., Владимиров ЮА, редакторууд. Үндсэн "ны науки - анагаах ухаан. Биофизикийн анагаах ухааны технологи. Москва: MAKS Press; 2015.v. 1. х. 38-71. орос.

2. Чанда С, Дэйв Р. Антиоксидант үйл ажиллагааны үнэлгээний in vitro загварууд ба антиоксидант шинж чанартай зарим эмийн ургамал: Тойм. Afr J Microbiol Res. 2009 оны арванхоёрдугаар сар; 3 (13): 981-96.

3. Хасанов В.В., Рыжова Г.Л., Мальцева Е.В. Методи исследования антиоксидант. Химижа Растител"ного Сыр"я. 2004; (3): 63-75. Орос.

4. Vasil"ev RF, K""ncheva VD, Fedorova GF, B""tovska DI, Trofimov AV. Antioksidantnaya aktivnost" khalkonov. Хемилюминестцентное оpredelenie reaktsionnoi sposobnosti i квантово-химический расчет энергии и строения реагентов и интермедиатов. Кинетик ба катализ. 2010; 51 (4): 533-41. орос.

5. Славова-Казакова АК, Ангелова С.Е., Вепринцев Т.Л., Дэнев П, Фаббри Д, Деттори МА, нар. Куркуминтай холбоотой нэгдлүүдийн антиоксидант чадавхийг химилюминесценцийн кинетик, гинжийг таслах үр ашиг, цэвэрлэх үйл ажиллагаа (ORAC) болон DFT тооцоогоор судалсан. Beilstein J Org Chem. 2015 оны 8-р сарын 11; 11: 1398-411.

6. Федорова Г.Ф., Трофимов А.В., Васильев Р.Ф., Вепринцев Т.Л. Перокси-радикал-зуучлагч химилюминесцент: механик олон янз байдал ба антиоксидант шинжилгээний үндэс. Arkivoc. 2007; 8: 163-215.

7. Федорова Г.Ф., Меньшов В.А., Трофимов А.В., Васильев Р.Ф.. Хүнсний ногооны липидийн антиоксидант шинж чанарыг тодорхойлох хялбар химилюминесценцийн шинжилгээ: үндсэн үндэслэл ба жишээ жишээ. Шинжээч. 2009 оны 10-р сар; 134 (10): 2128-34.

8. Бастос ЭЛ, Ромофф П, Эккерт CR, Баадер В.Ж. H2O2-геминээр өдөөгдсөн люминолоор антирадикал чадавхийг үнэлэх

9. Владимиров ЮА, Проскурнина Е.В. Свободные радикалы и клеточная хемилюминестценция. Усп Биол Хим. 2009; 49: 341-88. орос.

10. Владимиров ЮА, Проскурнина Е.В., Измайлов ДЮ. Кинетическая хемилюминестсенция как метод изучения реакции свободных радикалов. Биофизик. 2011; 56 (6): 1081-90. орос.

11. Измайлов ДЮ, Демин Е.М., Владимиров ЮА. Opredelenie aktivnosti antioksidantov методом измерения кинетики хемилюминестсен-ции. Фотобиологи ба фотомедицина. 2011; 7 (2): 70-6. орос.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. 2,2"-Азо-бис(2-амидинопропан) термолизийн нөлөөгөөр үүсгэгдсэн люминолын гэрэлтэлт. Free Radic Res Commun. 1992; 17 (5): 299-311.

14. Lissi EA, Escobar J, Pascual C, Del Castillo MD, Schmitt TH, Di Mascio P. Устөрөгчийн хэт исэлтэй метгемоглобин эсвэл оксигемоглобины хоорондох урвалтай холбоотой харагдах химилюминесцент. Photochem Photobiol. 1994 оны арваннэгдүгээр сар; 60 (5): 405-11.

16. Landi-Librandi AP, de Oliveira CA, Azzolini AE, Kabeya LM, Del Ciampo JO, Bentley MV, et al. HRP-H2O2-luminol системээр липосомын флавонолын антиоксидант үйл ажиллагааны in vitro үнэлгээ. J Microencapsul. 2011; 28 (4): 258-67.

17. Cormier MJ, Prichard PM. Механизмын судалгаа

зогссон урсгалын техникээр люминолын гэрэлтэгч хэт исэлдүүлэх. J Biol Chem. 1968 оны есдүгээр сарын 25; 243 (18): 4706-14.

18. Чан КЛ, Лин CS, Лай ГХ. Эмийн ургамлын таван хандын фитохимийн шинж чанар, чөлөөт радикалыг устгах үйл ажиллагаа, мэдрэлийн хамгаалалт. Evid Based Complement Alternat Med. 2012; 2012: 984295. дой: 10.1155/2012/984295. Epub 2011 оны 8-р сарын 10.

19. Чан КЛ, Лин CS. Terminalia chebula Retzius-ийн хандны фитохимийн найрлага, антиоксидант үйл ажиллагаа, мэдрэлийн хамгаалалтын нөлөө. Evid Based Complement Alternat Med. 2012; 2012: 125247. дой: 10.1155/2012/125247. Epub 2011 оны 7-р сарын 5.

20. Georgetti SR, Casagrande R, Di Mambro VM, Azzolini AE, Fonseca MJ. Төрөл бүрийн флавоноидын антиоксидант үйл ажиллагааг химилюминесценцийн аргаар үнэлэх. AAPS PharmSci. 2003; 5 (2): 111-5.

21. Алексеев А.В., Проскурнина Е.В., Владимиров ЮА. Opredelenie antioksidantov metodom aktivirovannoi khemilyuminestsentsii s ispol"zovaniem 2,2"-azo-bis(2-amidinopropana). Москвагийн их сургуулийн химийн товхимол. 2012; 53 (3): 187-93. орос.

22. Pogacnik L, Ulrih NP. Ургамлын хандны антиоксидант хүчин чадлыг тодорхойлоход оновчтой химилюминесценцийн шинжилгээг ашиглах. Гэрэлтэх. 2012 оны 11-12 сар; 27 (6): 505-10.

23. Saleh L, Plieth C. Нийт бага молекул жинтэй антиоксидантуудыг биологийн дээжинд химилюминесценцийг дарангуйлах шинжилгээгээр хэмжсэн хураангуй үзүүлэлт болгон. Nat Protoc. 2010 оны есдүгээр сар; 5 (10): 1627-34.

24. ЗСБНХУ-ын яам. ЗХУ-ын Государсвенная фармакопея. 11-р хэвлэл. Исс. 2. "Общие аргачлалын шинжилгээ".

Лекарственное раститель "ное сыр"е.. Москва: Медльцина; 1987. х. 147-8. Орос.

25. Сергунова Е.В., Сорокина А.А., Корнюшина М.А. Izuchenie ekstraktsionnykh preparatov shipovnika. Эмийн сан. 2012; (2): 14-6. орос.

26. Сергунова Е.В., Сорокина А.А., Аврач А.С. Изучение плодов боярашника различных sposobov консерваций и водных извлечений. Фермация. 2010; (5): 16-8. орос.

27. Avrach AS, Sergunova EV, Kuksova YaV. Биологически активные вещества плодов и водных извлечений малыны обыкновенной. Фермация. 2014; (1): 8-10. орос.

28. Avrach AS, Samylina IA, Sergunova EV. Izuchenie biologicheski aktivnykh veshchestv plodov boyaryshnika - syr"ya dlya prigotovleniya nastoek gomeopaticheskikh matrichnykh. "Развитие гомеопатического метода в современной медитин" Москвагийн 14-р бага хурлын илтгэл, 2014 оны 1-р сарын 2014; Москва. хуудас 146- 7. Орос.

29. Сергунова Е.В., Сорокина А.А. Izuchenie sostava biologicalheski aktivnykh veshchestv v lekarstvennom rastitel "nom syr"e razlichnykh sposobov konservatsii. "Человек и лекарство" Оросын 20-р үндэсний их хурлын илтгэл; 2013 оны 4-р сар 1519; Москва. Москва: ЭкООнис; 2013. х. 184-90. орос.

30. Александрова ЕЮ, Орлова М.А., Нейман ПЛ. Изучение пероксидазной активности в экстрактах из корневишча и корнеи хрена и ее стабил"ности к различным воздеиствиям. Москвагийн их сургуулийн Химийн товхимол. 2006; 47 (5): 350-2. Орос.